Biological Safety Cabinet (BSC) 미생물 파트 손 영 숙 미생물파트 손 영 숙

목 차 본 주제를 선택한 이유 진단검사의학과 내 BSC 설치현황 종류 정도관리 발생한 문제의 원인과 해결 요약

이 유 2005년 4월: BSC (class Ⅱ B2 ) 2005년 5월: 사용시작 결핵균 검사실에 설치 2005년 5월: 사용시작 2005년 6월: Air curtain 깨짐 이의 원인, 해결에 대한 공유 정도관리, 추후 안전대책 검토

과내 BSC 설치현황 기존 설치 신규 구입 합 계 ClassⅡ A2 2 5 7 ClassⅡ B2 1 Clean Bench 4 1 Clean Bench 4 공기를 통해 감염되는 미생물을 다룰 때  가급적 Ⅱ B2, Ⅱ B3, Ⅲ형 사용 권장 (Richard HK, et al. Clin. Microbiol Rev. 1991: 207)

BSC의 분류

ClassⅠBSC 안전대상: 실험자, 주위 환경 유입: 실험자 방향에서 유입 배출: HEPA필터 통해 외부 배출 (검체오염 가능성) 유입: 실험자 방향에서 유입 배출: HEPA필터 통해 외부 배출 내부공기비율: 100% 외부배출 공기흐름속도: 75 FPM

Class Ⅱ BSC (Type A2) 안전대상: 실험자, 검체, 유입: 실험자에서 BSC내부로… 배출: HEPA필터를 통해 주위환경 유입: 실험자에서 BSC내부로… 배출: HEPA필터를 통해 내부공기비율: 70% 내부 순환 30% 외부 배출 공기흐름속도: 75 FPM

Class Ⅱ BSC (Type B2) 안전대상: 실험자, 검체, 유입: 실험자에서 BSC내부로… 주위 환경 유입: 실험자에서 BSC내부로… 상단의 HEPA필터로 유입 배출: HEPA 필터를 거쳐서 외부 배관으로 100% 배출 내부공기비율: 0% 내부 순환, 100% 배출 공기흐름속도: 100 FPM

Class Ⅲ BSC 안전대상: 실험자, 주위환경 유입: 별도의 외부 배관 배출: HEPA필터를 거쳐 (최대한으로 보호) 유입: 별도의 외부 배관 HEPA필터를 통해 유입 배출: HEPA필터를 거쳐 외부 배관으로 배출 공기흐름속도: 100 FPM Room air HEPA-filtered Air Unfiltered Air under Negative pressure

Clean Bench 안전대상: 검체 배출: 필터를 거친 공기 검체의 오염 방지에 중점 인체에 무해한 미생물 일반 세포 실험 배출: 필터를 거친 공기 실험자 방향으로 배출 검체의 오염 방지에 중점 인체에 무해한 미생물 일반 세포 실험

Bio Safety Level과 BSC 선택 BSL: 사람 또는 환경에 영향을 미칠 수 있는 미생물을 다룰 때의 기준 Level 대 상 보 기 BSC 1 사람 및 환경에 무영향 Diphtheroid, Bacillus subtilis ClassⅠ 2 상처, 구강, 점막으로 감염 Salmonella Shigella ClassⅠor Ⅱ 3 공기로 Arbovirus Arenavirus ClassⅠor Ⅱ or Ⅲ 4 치명적 Ebolavirus ClassⅢ

BSC 사용 시작 사용중 사용후 검체 처리, QC전 10분 작업대 소독 공기 흐름 주의 (출입구 개폐, walking) 긴 소매 실험복 가장자리 피해 작업, 불꽃 사용 금지 사용후 15분이상 운행, 결핵검사실은 3시간이상 운행

BSC 정도관리 매일점검 매달점검 매년점검 Air flow 육안확인 Blower gauze (HEPA 필터 압력) 확인 수치가 2 배 이상 올라가면 HEPA 필터 교체 (0.8~1.6 mmHg) 매달점검 Vent cover 청소 매년점검 HEPA 필터 성능 확인 0.3 m 이상 particle 100개/cubic feet 미만 하루 2시간, 주 5일 사용 시 5년 사용 가능

문제발생시 점검 사항 Inflow Down flow Air curtain HEPA 필터 성능 검사 (기계회사에 의뢰)

Inflow check 2.5인치 열고 풍속계 BSC문을 2.5인치 연다 12부분의 공기속도 측정 ⇒ 평균값 269~296CFM (Cubic Feet per Minute)

Down flow check 풍속계 BSC 내부 바닥 12부분의 공기속도 평균값 55 ± 10 CFM

Air curtain 형성 연기 내부에서 외부로 새는 공기 확인

HEPA 필터 check Particle 측정기 BSC 바닥 0.3 m 이상 particle <100개/CFT 1회당 10초 총 20회 반복 시험

문제의 원인과 해결 Ⅰ BSC 내부공기가 실험실로 역류 5월중순 Air curtain이 깨짐 (공기배출량＜유입량) 6월중순  7층 배출구 중간에 위치한 Fan이 미작동  자동 On and Off 시설 추가 5월말 Air curtain이 깨짐 (공기배출량＜유입량) 6월중순  FAN의 pulley 교체  FAN과 pulley 모두 교체 6월말 풍량이 감소 7월초  장비와 배출관 (duct) 연결부위의 재질이 약하여 수축, 팽창시 변형  PVC관으로 교체 9월말

문제의 원인과 해결 Ⅱ BSC내부공기가 실험실로 역류  관련된 실험자 3명 감염관리실 경유, 내과 진료 투베르쿨린 반응 검사(PPD test) 흉부 방사선 촬영 두 달 후 follow up  이상 소견 없었음!!!

요 약 중간 배출장치 및 배기구 보완 결핵균 검사실에서의 추가 안전 대책  Flow monitor (AiroGard Hi-Lo BSC Airflow Monitor) 부착 ― 배출 공기 유속 측정 ― 허용범위를 벗어날 경우 alarm  작업 중단, 원인 분석 교정 현재 배출구: 원거리 (7층) BSC의 종류, QC 및 문제 발생시 대비