USP vs. KP 일반시험법 비교(4)

각 공정서에 등재된 미생물학적 시험법 항목 비교

미생물시험법 무균시험법 미생물한도시험법 생균수시험 특정미생물시험 주사제, 관류제, 이식제 점안제, 안연고제, 점이제 비무균제제 배양법으로 증식할 수 있는 미생물(세균 또는 진균)의 유무를 시험하는 방법으로, 상기 제제에서 미생물의 발육이 관찰되어서는 안 된다. 의약품 등에 증식능력을 가진 미생물(세균 또는 진균)의 수를 정량적으로 측정 인체에 위해한 특정미생물(대장균, 살모넬라균, 녹농균 및 황색포도상구균 등)의 존재 여부를 확인 - 멤브레인필터법 - 직접법 - 한천평판도말법 (한천평판혼합법, 한천평판도말법) - 최확수법 - 담즙산저항성 그람음성균 - 대장균 - 살모넬라균 - 녹농균 - 황색포도상구균 - 클로스트리디아균 (Clostridium) - 칸디다균 (Candida albicans) 국제조화 (KP ≒ JP ≒ USP ≒ EP)

각 공정서별 차이점이 있음 (다음 슬라이드 참조) 미생물시험법 항생물질의약품의 역가시험법 보존력시험법 (일반정보) 항생물질 제제 보존제를 사용하는 제제 생물학적 활성을 측정하기 위해 미생물학적 역가시험법을 실시하는데, 원통평판법, 표준곡선법, 비탁법에 의해 미생물 성장저해 정도를 측정 사용된 보존제의 효력을 미생물학적으로 평가 각 공정서별 차이점이 있음 (다음 슬라이드 참조)

항생물질 별로 시험균주, 배지, 배양온도, 배양시간, 접종액 등이 각각의 monograph에 규정 항생물질의약품의 역가시험법 내용 KP EP USP JP 시험 조건 배지 및 균액 조제법, 배양조건 등은 규정되어 있으나, 시험균주는 monograph에서 규정 항생물질 별로 시험균주, 배지, 배양온도, 배양시간, 접종액 등이 각각의 monograph에 규정 좌동 KP와 동일 배지 종층용 및 기층용 한천배지 시험균이식용한천배지 시험균부유용액체배지 시험법 원통평판법 표준곡선법 비탁법 Diffusion method Perforated plate method Turbidimetric method Cylinder plate assay Turbidimetric assay 천공편팡법

Antimicrobial preservatives (보존제) 무균 혹은 비무균 multi-dose 제제에, 원하지 않는 미생물의 증식을 방지하기 위해 첨가하는 부성분 조건 주성분의 약리활성에 영향을 미치지 않을 것 인체에 독성을 내지않도록 되도록 최소의 양을 사용할 것 사용기간 내에서 의약품의 품질을 유지할 것 (주성분의 물성 및 제제의 안정성에 영향이 없도록) 확실한 미생물 증식 방지를 보이며, 그 효과가 일관적일 것 제제화에 용이할 것 시험 시기 제제개발 연구 중 Scale-Up 사용기간 중 어느 시기든 가능

Procedure 시험에는 5계대 이하의 균주 사용 5개의 검체에 검체 부피의 0.5~1.0%에 해당하는 부피의 균주 접종 (1/100초과 X) 접종 후 검체의 균주 농도 Class 1~3: 105~106cfu/mL Class 4: 103~104cfu/mL ※ (105~106cfu/mL) 균주 접종 후 incubation 온도: 20~25℃ (& 차광) 적절한 시기에 검체로부터 샘플링 (1g or 1mL) 외관을 관찰하여 특이한 변화가 관찰되면 기록해 둘 것 Plate-count method (미생물한도시험의 한천평판법)을 이용하여 cfu 확인 ※ ( ): KP = JP = EP

공정서별 보존력시험법 비교 내용 KP = JP USP EP 명칭 시험 균주 배지 시험법 측정 시기 허용범위 보존력시험법 <51> Antimicrobial Effectiveness Testing <5.1.3> Efficacy of Antimicrobial Preservation 시험 균주 Staphylococcus aureus ATCC 6538 Escherichia coli ATCC 8739 Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 Candida albicans ATCC 10231 Aspergillus niger ATCC 16404 좌동 ※1 배지 (세균) 대두카제인소화(액체 or 한천)배지 (진균) 사브로·포도당(액체 or 한천)배지 GP(포도당·펩톤)한천배지 감자·포도당한천배지 시험법 20~25℃, 차광 20~25℃ 측정 시기 14, 28일 7, 14, 28일 6h, 24h, 7, 14, 28일 허용범위 다음 페이지 슬라이드 참조 다다음 페이지 슬라이드 참조 ※1: EP에서는 경구제제인 경우에는 Escherichia coli ATCC 8739에 대한 보존력시험을 권정하고 있음 또한, 고농도의 당을 함유하는 경구제제인 경우에는 Zygosaccharomyces rouxii NCYC 381에 대한 보존력시험 또한 권장하고 있음 ※ ATCC: American Type Culture Collection

보존력시험법 (KP) 분류 제제 판정기준 ※ 시험 초기 접종 균수: 100으로 본다. 14일 후 28일 후 I A 주사제 및 무균의 비경구제 (세균) 접종균수의 0.1% 이하 (진균) ≤접종균수 (세균) ≤14일 후의 수준 I B 비무균의 비경구제 (세균) 접종균수의 1% 이하 I C 경구액제 (쓸 때 용해 또는 현탁하여 쓰는 시럽제 포함) (세균) 접종균수의 10% 이하 II 비수용성의 기제 또는 용제를 써서 만들어진 제제 (세균/진균) ≤접종균수 ※ 시험 초기 접종 균수: 100으로 본다.

<51> Antimicrobial Effectiveness Testing

각 공정서의 보존제시험법 결과 판정 비교

<51> Antimicrobial Effectiveness Testing