Pipette의 사용법과 Buffer의 용량 계산법

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1 Pipette의 사용법과 Buffer의 용량 계산법
기초생명과학 및 실험 7주차

2 Pipette이란? Pipette 실험 Buffer의 용량 계산법

3 Pipette이란 ? 액체의 일정량을 가하거나 꺼내는 기구 Micro pipette
범위는 𝑢𝑙

4 Plunger button with volume adjustment Tip ejector button
Volume adjustment knob Digital volume indicator Stainless steel ejector arm Polypropylene disposable tip

5 Plunger button with volume adjustment
Plunger button은 Plunger를 위, 아래로 움직이도록 손으로 누를수 있는 버튼, 피스톤 역할을 하는 장치 최소범위부터 최대범위 까지를 확인 할 수 있음 Volume adjustment knob Micro Pipette으로 취할 액체의 양을 정해주는 장치 Digital volume indicator Polypropylene tip 안으로 빨아들일 액체의 양이 표시되는 부분 Polypropylene disposable tip 간단하게 Tip이라고도 부름

6 Tip ejector button & Stainless steel ejector arm
Ejector button을 누르면 자연스레 stainless steel ejector arm이 plastic shaft를 타고 내려오면서 tip을 밀어내어 MicroPipette으로부터 제거 ★ Digital volume indicator 1 2 2 𝒖𝒍 Pipette 20-200𝒖𝒍 Pipette 2-20𝒖𝒍 Pipette

7 Pipette 실험 첫 번째 실험 두 번째 실험 1. EP tube를 준비한다.
2. 70% EtOH 1ml, DW 1ml 씩 tube에 옮긴다. 3. 70% EtOH 1ml과 DW 1ml 볼륨을 비교해 본다. 두 번째 실험 DW를 1ml로 한번과 200𝑢𝑙 x5번을 각각 Tube에 옮긴다. 2. 저울을 이용하여 두 tube의 질량을 측정한다.

8 Pipette 결과 예상 ★Volume의 비교 70% EtOH ( < , > ) DW
DW 1000𝒖𝒍 1번 ( < , >) DW 200𝒖𝒍 𝟓번

9 Buffer의 용량 계산법 퍼센트(%) 농도 용액 100ml 속에 녹아있는 용질의 질량(g)
= (용질의 질량 / 용액의 질량 ) x 100 = (용질의 질량 / (용매 + 용질)) x 100 용질의 질량(g) = (용액의 질량 x % 농도) / 100

10 몰 농도(M) n = w / Mt 용액 1L 속에 녹아 있는 용질의 몰(mole)수 1 몰(mole)은 분자량에 g을 붙인 값
즉, 1M 수산화 나트륨(NaOH, m.w=40) 용액인 경우는 물 1L에 수산화나트륨 40g을 녹이면 됨 부피가 V (L)인 용액에 녹아 있는 용질이 n몰이라면 이 용액의 몰농도(M)는? 용액 V(L)에 녹아있는 용질이 w(g)이고 용질의 분자량이 Mt라 하면 용질의 몰수 n = w / Mt

11 농도의 전환 고체인 수산화나트륨 1M 용액인 경우는 물 1L에 수산화나트륨 40g을 녹이면 쉽게 몰용액을 만들 수 있지만 연산과 같이 %농도일 경우의 약품은 이를 퍼센트 농도를 환산하여 몰농도로 만들어 주어야 함 % 농도를 몰 농도로 환산하기 농도가 a%, 밀도가 d g/cm3, 용질의 분자량이 Mt인 용액을 몰 농도(M)를 구하는 방식 용액 부피가 1L일 경우 이 속에 있는 용액의 질량 = 부피 x 밀도 = 100ml x d(g/cm3) = 1000d (g)

12 당량농도 어떤 양성 원소와 결합할 수 있는 화합물의 중량, 즉 당량으로 나타낸 농도를 말한다. 여기서 한 화합물의 분자량을 양이온의 산화수로 나눈 값과 같음 원소의 당량 = 원자량 / 원자가 적정을 이용한 정량분석 실험에 있어서의 용액의 농도는 당량농도이다 화 합 물 1몰(mole) 1g 당량 원자가 염산(HCl) 36.5 1 황산(H2SO4) 98 49 2 수산화나트륨(NaOH) 40 수산화칼슘 (Ca(OH)2) 74 37 탄산나트륨(Na2CO3) 106 53

13 용질, 용매 용액의 뜻 용질 : 어떤 액체에 녹아드는 물질을 말함 용매 : 어떤 물질을 녹이는 물질을 말함
용액 : 용질과 용매의 혼합액이라고 함 포화 : 용질이 용매에 더 이상 녹지 않을 만큼 최고로 녹아있는 상태를 말함 용해도 : 용질이 포화에 이를 때까지 용매에 녹는 양을 말하는데, 물질에 따라서 혹은 온도에 따라서 또는 용매에 따라서 용해도는 차이가 있음