감염성 질환의 혈청학적 검사 매독의 혈청학적 검사 암시야법 직접면역형광법

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1 감염성 질환의 혈청학적 검사 매독의 혈청학적 검사 암시야법 직접면역형광법
비트레포네마 검사(non-treponemal test) 리포이드성 항원을 사용하여 혈청내 reagin검출 Venereal disease research laboratory(VDRL) Rapid plsma reagin test(RPR) Unheated serum reagin test(USR) Reagin screening test(RST) 선별검사 1기, 2기 매독의 진단 정량적 검사 : 진단과 치료경과 고역가 : 활동성 감염 1:8 미만 : 잠재감염, 이전의 치료, 만기매독

2 Treponema 검사에서 위양성이면 1 개월 간격으로 재검
혈청전환 : 1기 매독 1년이내, 2기 2년 이내 위양성 : 10-30% 급성위양성 : 6개월내 음성 세균 및 바이러스성 감염 폐렴, 아급성 세균성 심내막염,간염, 말라리아, 전염성 단핵구증, vaccinia, 결핵 , 수두, 나병, 예방접종 만성위양성 반응 6개월 이상 장기간 지속 SLE 등 자가면역질환 약 물남용, 임신, 노령 Treponema 검사에서 위양성이면 1 개월 간격으로 재검

3 트레포네마 검사(treponemal test)
매독균 특이항원 검출 매독 트레포네마 형광항체흡착시험(fluorescent tereponemal Ab absorption test, FTA-ABS) 트레포네마감작혈구응집시험(T. pallidum hemagglutination, TPHA), MHA-TP FTA-ABS : 확진검사 만기매독이 의심되는 경우 위양성 : 0.3-2%

4 선천성 매독 신경 매독 매독균 증명 : 암시야법 제대혈 VDRL>모체혈 VDRL VDRL역가의 증가 관찰
뇌척수액 VDRL, FTA-ABS 혈청 RPR, VDRL 양성률(50-75%) FTA-ABS : 95% 양성률 매독항체는 BBB를 통과하지 않음 FTA-ABS 민감도가 높고, VDRL은 특이도가 높다

5 연쇄구균 감염의 혈청학적 검사 국소 및 침입성 형태 연쇄구균감염후증 ASO(항원 : Streptolysin O)
인두염, 농피증, 봉와직염, 단독, 패혈증 연쇄구균감염후증 급성류마치스열, 사구체신염 ASO(항원 : Streptolysin O) Anti-Dnase B(항원 : Deoxyribonuclease B) Anti-NADase(항원 : nicotinamide adenine dinucleotide) AH(항원 : hyalouronidase) Streptozyme 검사(항원 : extracelluar product의 혼합항원)

6 양성률 연쇄구균 감염의 기왕력이 있는경우 : ASO : 단독 80% ASO+1 test : 90% ASO+2 test : 95% ASO test Hemolysis inhibition test 혈청 + streptolysin O – 환자혈청내 ASO가 있으면 용혈이 억제 용혈을 일으키지 않는 혈청의 최대 희석 배수의 역수 Todd unit Latex 응집법 : 반정량검사 Nephelometry 200 IU/mL 이상, 2-4주간의 역가가 2배이상 증가시 의의 급성 류마치스열의 80%, 사구체신염의 95%에서 증가

7 위달시험(widal test) Salmonella O항원과 H 항원에 반응하는 응집소 검출
Rapid slide test, tube test, microplate test S. typhi O >1:160, H > 1:320, 연속 검사로 titer가 증가하는 경우 (2000년 7월 O titer 1: 320 이상) 민감도와 특이도 낮음 교차반응, 초기에 항균제 투여시 역가가 증가하지 않고, 살모넬라성 위장관염에는 효용성이 없음.

8 급성기 반응 물질(Acute phase Reactants, APR)
감염, 손상, 수술, 외상, 조직괴사 등 급성 염증 반응시 증가 Alpha-1 antitrypsin, alpha1-acid glycoprotein, haptoglobin, ceruloplasmin, fibrinogen, CRP C-reactive protein(CRP) APR중 가장 빨리 증가하고 치료시 가장빨리 정상화 APR 중 가장 많이 증가 수술 후 반응의 추적, 잠재감염의 확인, 자가면역질환의 질병활성도 평가 Latex 응집법, 모세관침강법, Nephelometry High sensitive CRP : 심근 질환의 한 지표

9 결핵의 피부반응 검사: Tuberculin skin test
M. tuberculosis균주로 부터 정제하여 얻은 시약 결핵이 임상적으로 의심이 되는 경우 시행 Moutoux test : 2 TU를 피내주사 감염 후 3주-3개월 후에 투버쿨린 검사상 양성 위양성 : 비정형 결핵균, BCG 접종 받은 경력이 있는 경우 위음성 ; 바이러스성 감염(홍역, 유행성 이하선염, 수두, 인플루엔자 등) 면역억제(약물, 단백영양실조), 노령, 스트레스, 동반질환(sarcoidosis, 악성종양, 림프종), HIV 감염, 생바이러스 백신 접종, 기술적 실수, 시약의 변성

10 기타 감염성 질환의 혈청학적 진단 톡소플라스마증 아메바증 마이코플라스마 폐렴 헬리코박터위염 레지오넬라증 라임병
유행성출혈열에 대한 삼중검사 폐흡충항원 피내검사 진균감염의 혈청학적 진단

11 기타 감염성 질환의 혈청학적 진단 Toxoplasmosis Amebiasis Toxoplasma gondii
Giemsa : trophozoites or cysts 관찰 Indirect immunofluorescence, ELISA, indirect hemagglutination Amebiasis Entameba histolytica 장내 아메바 : 신선한 대변에서 충체 장외 아메바 : 스캔 초음파, 혈청학적 검사 IHA 1: 256 이상시

12 3. Mycoplasma pneumoniae
배양, species specific nucleic acid probe method, PCR, cold agglutinin1:32, 1:64이상시 양성, 민감도와 특이도 낮음, 혈청내 항체 양성( IgM 양성 또는 IgG가 4배이상 증가) 4. Helicobacter pylori gastritis 조직 Urease 검사, 혈청학적 검사(선별검사), urea breath test 5. Legionellosis Legionella pneumophila, 배양, 직접면역형광법, 항체(1:128이상, 4배이상 증가), L. pneumophila I 항원 검사, nucleic acid probe test 6. Lyme disease, lyme borreliosis Borrelia burgdorferi, 특이항체

13 7. Triple antibody test 8. 폐, 간흡충 항원 피내반응검사 9. 진균감염의 혈청헉적 진단
Leptospirosis : 배양, 수동혈구응집법 쯔쯔가무시열 : 수동혈구응집법 한국형 출혈열 ; Hantaan virus(Bunyaviridae family Hanta virus genus) 입자응집법 8. 폐, 간흡충 항원 피내반응검사 폐/간흡충에 대한 지연성 과민 반응을 보는것 피부에 항원 주사 구진이 60 mm2 이상시 양성 모두 60 mm2이상이면 양쪽의 감염을 의심하나 큰쪽의 반응을 중시 9. 진균감염의 혈청헉적 진단 Candidiasis Cryptococcosis Aspergillosis

14 바이러스 감염의 혈청학적 진단 개요 배양이 까다로운 경우, 배양시 동물 접종이 필요한 경우, 생물학적 위험이 있는 경우
4 배이상의 항체 역가 증가, 음성에서 양성으로 변환 IgM : 현재 감염 2. 선천성 바이러스 감염 : TORCH 검사 CMV : CMV분리, CMV IgM Rubella : Anti-rubella IgM, nested RT PCR HSV : Anti-HSV-IgM, shell vial culture, PCR HIV : ELISA, western blot, HIV-RT PCR monitoring Parvovirus B19 : Anti-parvovirus B19 IgM, PCR Enterovirus

15 Typical Serological Profile After Acute Infection
Note that during reinfection, IgM may be absent or present at a low level transiently

16 바이러스성 간염 Hepatitis A HBV HCV
Anti-HAV IgM, HAV항원 : 대변, PCR HBV HCV HDV: 외피에 HBs Ag을 필요로 하는 불완전 바이러스, HBV와 동시에 감염되어 있는 경우에만 감염을 일으킬 수 있다. Anti-HDV Ab, HDV RT PCR HEV : Anti-HEV, PCR

17 Hepatitis A virus infection
Clinical illness Infection ALT IgM IgG Viremia Response HAV in stool The diagnosis of acute HAV infection is confirmed during the acute or early convalescent phase of infection by the presence of IgM antibodies to HAV (IgM anti-HAV). IgM anti-HAV is generally present 5-10 days before the onset of symptoms and is no longer detectable in the vast majority of patients 6 months later. IgG anti-HAV, which also appears early in the course of infection, remains detectable for the lifetime of the individual and confers lifelong protection against infection. Commercial tests are available for the detection of IgM and total (IgM and IgG) anti-HAV in serum. In infected persons, HAV replicates in the liver, is excreted in bile, and is shed in the stool. Peak infectivity occurs during the 2-week period before onset of jaundice or elevation of liver enzymes, when the concentration of virus in stool is highest. The concentration of virus in stool declines after jaundice appears. Children and infants can shed HAV for longer periods than adults, up to several months after the onset of clinical illness. Chronic shedding of HAV in feces does not occur; however, shedding can occur in persons who have relapsing illness. Viremia occurs soon after infection and persists through the period of liver enzyme (alanine aminotransferase [ALT]) elevation. HAV RNA can be detected in the blood and stool of most persons during the acute phase of infection by using nucleic acid amplification methods, such as PCR, and nucleic acid sequencing has been used to determine the relatedness of HAV isolates. These methods, however, are available in only a limited number of research laboratories and are not used generally for diagnostic purposes. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Week

18 HBV HBe Ag: 바이러스 증식, 감염력 ↑ HBs Ag: 급성감염, 만성 보균자에서 발견
Anti-HBc Ab: IgM : 최근감염 Anti-HBs Ab: Anti-Hbe Ab: HBV DNA: 증식 감염력

19 Acute Hepatitis B Virus Infection with resolution of symptoms
HBeAg anti-HBe Total anti-HBc Titre anti-HBs HBsAg IgM anti-HBc 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 100 Weeks after Exposure 30

20 Progression to Chronic Hepatitis B Virus Infection
Acute (6 months) Chronic (Years) HBeAg anti-HBe HBsAg Total anti-HBc Titre IgM anti-HBc 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 Years Weeks after Exposure 31

21 HCV Anti-HCV Ab + : repeat test HCV RT PCR
Repeat test (+): confirm by Recombinant immunoblotting assay HCV RT PCR Quantitation of HCV RNA HCV serotyping & genotyping

22 Acute HCV Infection with Recovery
anti-HCV Symptoms +/- HCV RNA Titer ALT Normal 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 Months Years Time after exposure

23 Serologic Pattern of Acute HCV Infection with Progression to Chronic Infection
anti-HCV Symptoms +/- HCV RNA Titer ALT Normal 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 Months Years Time after exposure

24 Hepatitis D (Delta) Virus
d antigen HBsAg RNA 19 19 19

25 EBV Mono spot test VCA(Viral capsid Ag)-IgM Ab: 발병 초기에 나타남 VCA-IgG Ab:
EA(early Ag):바이러스 증식, 감염 초기에 나타나서 6개월 내지 수년 뒤 사라짐 EBNA(EB nuclear Ag)-IgG: 가장 늦게 나타나며 영구히 지속되어 초감염과 재감염의 지표