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유전정보의 발현 : DNA RNA 단백질 (전사) (번역) 진핵세포의 경우
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: induction, repression. 질적조절 (활성의 조절): : zymogen, compartmentation,
효소활성의 조절 (생화학반응의 조절) 양적조절 (유전적 조절) : induction, repression. 질적조절 (활성의 조절): : zymogen, compartmentation, allosteric regulation, feedback inhibition, regulation by signal (ex, hormon) 3. EC 에 의한 조절
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전사: DNA와 RNA polymerase와의 상호 관계
생산물은 RNA (mRNA, tRNA, rRNA, hnRNA, snRNA 등) * DNA 와 RNA의 비교 DNA RNA 구조 이중나선 단일나선 (hairpin loop) Ntd: sugar, base 알카리 가수분해 산가수분해 Attacked by Dnase Rnase Tm high low Density low high
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DNA는 왜 uracil 대신에 thymine을 가지고 있는가?
Cytosinedml 자발적 deamination Uracil은 adenine가 상보적 결합 Uracil-DNA glycosidase 발견
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Quiz) DNA는 왜 ribose대신에 deoxyribose를 가지는가?
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전사: DNA로부터 NTP, Rpase를 사용하여 RNA를 만드는 과정
rRNA : tRNA : mRNA = 80: 15: 5 rRNA (ribosomal RNAs): 23S(3700 ntds), 16S (1700 ntds) 5S (120 ntds) tRNA: ~ 75 ntds mRNA : heterogeneous state.
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Jacob-Monad의 전령의 추론 1. 전령은 DNA 조성을 반영할것 (즉 정보의 전달자) 2. 전령의 크기는 다양할 것 3. 전령은 polynucleotide일 것 4. 전령은 ribosome과 일시적으로 회합할 것 5. 합성과 분해가 신속할 것
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mRNA 존재의 실험적 증명 T2 phage를 대장균에 감염후 새로운 단백질이 어떻게 합성되는가 (15N, 13C 14N, 12C, 32P, 35S) 새로운 리보좀이 생산 기존 robosome이 새로운 RNA와 결합하여 생산 2. T2 파아지 감염후 만들어지는 새로운 RNA는 T2 파아지 DNA 와 hybridize…. 32P-RNA vs 3H-DNA
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전사 : 주형, 전구체 (NTP), 2가 양이온, RPase Refer: 주형 특이성 (ds DNA, ss DNA- okey,
원핵세포의 경우 전사 : 주형, 전구체 (NTP), 2가 양이온, RPase Refer: 주형 특이성 (ds DNA, ss DNA- okey, 반면 RNA-DNA, ssRNA, dsRNA는 주형으로 작동하지 않음) DNA-dependent RNA polymerase: holoenzyme(ααββ`σ)으로 구성, σ가 제거된 경우 core enzyme 핵산가수분해 활성이 없다 (fidelity 10-4 ~ -5) 노출된 3`OH가 비필요 DNA합성과는 달리 보존적이다. 전사개시는 holoenzyme 과 NTP 요구 : promoter 결합 – open promoter complex 형성 (Sigma factor는 각각의 promoter site인식, double helix unwinding) 다양한 sigma factor 가 존재)
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전사 (원핵): 개시 – 연장 – 종결 (see next page)
전사의 개시: promoter (~ 40 bp)= recognition site + binding site (Pribnow box : TATA box) 전사개시는 A, or G에서 시작 즉 pppA, pppG (전사시 주형의 선택성 : ??? !!!) RNA는 5`-3`로 합성, RPase는 3’ -> 5`로 이동 (초당 약 50 ntds)
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DNA footprint
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연장 : 전사 개시후 약 8 bp 합성 이후, σ factor의 해리
종결 : GC rich terminator (rho-dependent, rho-independent) 구조 : GC rich – AT rich - UUUU 전사종결인자 : (로우) 합성 RNA가 로우 존재유무에 따라 길이가 다르다는 사실에서 시작 즉 로우 없이도 전사 종결 가능, (rho-dependent 경우 ATP소모)
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전사후 가공 (post-transcriptional processing)
mRNA – 거의 무 가공 rRNA, tRNA 의 동시생산 3. 염기 및 리보오스의 수식 및 변화
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원핵세포의 mRNA – polycistronic
Cistron : The section of the DNA moleculrs that specifies the formation of a particular polypeptide chain. Operon : 여러 관련 인접 cistron에 의한 조합으로 유전자 발현의 최소단위 ( regulator + promoter + operator + structural) Regulon: 동일 regulator gene 에 의해 조절되는 a non-contiguous group of genes See next page Cf. 진핵세포의 경우에는 거의 다 monocistronic 임 (특별한 rRNA, tRNA를 제외한 경우)
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- 3종류의 DNA-dependent RNA polymerase 관여
진핵세포의 경우 - 3종류의 DNA-dependent RNA polymerase 관여 진핵세포 mRNA는 만들어진후 바로 단백질 합성에 이용되지 못한다… 많은 수식과 변화후 리보솜과 사귀기 시작한다. amanitin
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전사개시는 A, or G에서 시작 5’ – cap 구조 와 3’ poly A tail 구조
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5’ cap 및 3’ poly A의 역할 탈인산 가수분해, 핵산가수분해 효소로부터 RNA를 보호 (mRNA의 안전성 기여) 2. 번역 증진 3. 핵막을 통과하는 signal (??)
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- 전사후 가공 (post-transcriptional processing)
splicing (hnRNA): exon, intron (GU ~ AG) 또는 (GA ~ AG)
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