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Transfer trouble 10% gel Loading : 70V 2시간 10분, 100V 1시간 30분

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1 Transfer trouble 10% gel Loading : 70V 2시간 10분, 100V 1시간 30분 Tank buffer : 20% methanol 함유 Loading protein : 50ug Transfer : 300mA, 3시간 260 160 110 80 60 50 40 쿠마시 용액은 산성용액에서 단백질과 결합하면 absorbance값이 nm에서 595nm 변함 - 이 원리를 이용하여 Bradford Method로 단백질을 정량할 수 있음 (protein assay Useful for determining protein concentration from 100-1,500 µg/ml) 이름의 유래는 지금의 아프리카 가나지역의 쿠마시 지역명에서 유래 Tansfer의 문제점 발견 : transfer sandwich를 만들때 gel을 심하게 기포제거하려고 하여 중간부분이 볼록해지는 경향을 나타내었다. Transfer의 grandient 발견 : 분자량이 클수록 gel에 많이 남아있고 분자량이 작은 것일수록 transfer가 많이 되어 ponceau staining 결과 밑 부분으로 갈수록 진해지는 경향을 보았다.


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