전남 지역 설사환자에서 분리한 장염비브리오균 분자역학적 특성

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1 전남 지역 설사환자에서 분리한 장염비브리오균 분자역학적 특성
전남 지역 설사환자에서 분리한 장염비브리오균 분자역학적 특성 미생물과

2 목 차 1. 2. 3. 4. 5. 실험방법 6. 장염비브리오균의 특성 장염비브리오균 혈청형 분류 유형 식중독 발생 현황 배 경
목 차 장염비브리오균의 특성 1. 장염비브리오균 혈청형 분류 유형 2. 3. 식중독 발생 현황 4. 배 경 5. 실험방법 6. 결 과

3 장염비브리오균 특성 병 원 체 : Vibrio parahaemolyticus 호염균, 그람음성 잠 복 기 : 6∼ 12시간
잠 복 기 : 6∼ 12시간 증 상 : 구토, 복부경련, 미열, 오한, 위장염, 물 설사 역 학 : 어패류 생식한 사람에 감염 우리 나라 6 ∼ 10월 사이 발병 여름철 해산물의 약 80% 오염

4 Vibrio parahaemolyticus

5 Gram(+, -)염색 차이 Gram(-) (Gram+)

6 전자현미경상 장염비브리오 형태

7 장염비브리오 혈청형 분류 O항원 11종, K항원 71형 분류(일본) 혈청형 표기는 O : K 형으로 표기

8 월 별 식중독 발생 현황 2005년도

9 장내세균 현황(균주별) 2006년도

10 장내세균 현황(균주별) 2007년도

11 배 경 도내 지리적 여건과 어패류의 생식을 즐기는 식습관 등을 고려 할 때, 장염비브리오균에 의한 식중독의 위험 상존
배 경 도내 지리적 여건과 어패류의 생식을 즐기는 식습관 등을 고려 할 때, 장염비브리오균에 의한 식중독의 위험 상존 해수·어패류 등에서 높은 빈도로 분리되고 있어, 발생 경향의 조사와 식품위생학적 측면에서 연구

12 장염비브리오 병원성인자 내열성 용혈독(Thermostable Direct Hemolysin-TDH)
-혈액한천배지에서 kanagawa(KP) 내열성 용혈독 유사독소(TDH-related hemolysin,TRH)

13 연구목적 혈청형 분포, 병원성과 관계된 독성유전자 분석 장염비브리오균 유전자 특성파악 ’02년부터 ’05년까지 전남지역
설사환자에서 분리된 V.parahaemolyticus 대상으로 유전자의 유사성을 분석코자 PFGE (Pulsed field gel electrophoresis)로 분석함으로써 V. Parahaemoly ticus에 의해 유발되는 장염비브리오균 유전자 특성파악

14 대상 및 방법 대 상 : 전남지역 설사환자에서 분리된 균(2002 ~2005년도) O : K 혈청형 분류
대 상 : 전남지역 설사환자에서 분리된 균(2002 ~2005년도) O : K 혈청형 분류 tdh 및 trh 유전자 분석(독소형 유전자) TDH(내열성 용혈독)생성시험 PFGE(Pulsed field gelectrophoresis) 분석

15 혈청형 분류(연도별)

16 혈청형 분류(지역별)

17 내열성(tdh), 내열성유사독소(trh)
F GGT ACT AAA TGG CTG ACA TCC 198 R CCA AAT ACA TTT TAC TTG GAA trh F GGC TCA AAA TGG TTA AGC GCC 250 R CAT TTC CGC TCT CAT ATG CTT

18 독소 유전자(tdh, trh)

19 PFGE 1980년 이전 미생물병원체 유연관계 혈청형, 생물학적특성, 파아지형 분류 세균의 DNA를 제한효소로 절단
각 균주 간에 절단양상이 아종에서만 나타나는 독특한 밴드 형태 확인 8개 이상 염기서열 인식으로 제한효소 절단으로 종별로 15개 정도의 DNA절편 생산 대상균주 모집-DNA추출-블럭-효소처리-세척-전기영동-사진, 분석

20 PFGE(pulse field gel electrophoresis)

21 Dendrogram의 유전자 분석(유사성)

22 결 론 PFGE유전자 36균주 분석결과는 혈청형 O4:K68에 12균 일치 하였고, 2개 균주는 89.6 %, 85.7 %의
결 론 1 PFGE유전자 36균주 분석결과는 혈청형 O4:K68에 12균 일치 하였고, 2개 균주는 89.6 %, 85.7 %의 유사성을 보여 유전적으로 가까움을 알 수 있었다. 2 O3:K6형의 유전자 분석결과는 4균주는 100 %일치 3 2005년 구례에서 분리된 1균주(O3:K6형의)는 연관도 93.3 %으로 유전적 차이가 거의 없었다. 4 PFGE 유전자형 연관도가 40.7 %까지 널리 퍼져 있어 다양한 유형으로 존재했다.