Clostridium difficile 정량 배양과 반정량 배양의 비교 진단검사의학과 미생물계 박상준.

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1 Clostridium difficile 정량 배양과 반정량 배양의 비교 진단검사의학과 미생물계 박상준

2 Clostridium 대부분 편성 혐기성 세균 일부 균종은 내기성 형태 : 막대모양, 곧거나 약간 굽음 그람양성 간균 항균제 유발 설사 위막성 대장염 토양, 물, 동물의 장내 독소 생성 : A 독소 (enterotoxin), B 독소 (cytotoxin) C. difficile

3 Cytotoxin gene No. (%) of specimens with C. difficile (CFU/mL) Total 10 2 - <10 3 10 3 - <10 4 10 4 -<10 5 10 5 -<10 6  10 6 Positive4 (1.0)9 (2.2)30 (7.5)58 (14.4)301 (74.9)402 (100) Negative2 (2.1)6 (6.5)16 (17.2)22 (23.7)47 (50.5)93 (100) Total6 (1.2)15 (3.0)46 (9.3)80 (16.2)348 (70.3)495 (100) C. difficile 감염 진단을 위한 정량배양 평가

4 실험 목적 정량법 시험 workload 감소 필요 반정량법 결과, 독소생성 시험 : – 결과의 해석에 어려움이 없을 것으로 예상 검사원가 절감

5 검체 채취와 수송 신선한 설사변 1 - 2 ml 고형변 - 의미없음 4 ℃에 2 일간 보관 가능

6 배 양 Modified CCFA (cycloserine cefoxitin egg yolk fructose agar) : Amphotericin 첨가 24 - 48 시간 37 ℃ 배양 후 관찰 집락 : 담황색, 원형이거나 불규칙, 편평 가장자리는 나무뿌리 모양 표면은 굵은 유리 p - cresol 냄새

7 정량 배양 CCFA-A 에 1/10, 1/1,000, 1/10,000 로 희석 배양 희석시 anaerobic thioglycollate 배지 이용 Colony 수를 센 후 희석배수를 곱하여 변 1g 당 세균수 계산 반정량 배양 기간 : 2003. 2. 3 - 2. 22 (20 일간 ) CCFA-A 에 변을 직접 접종 배양 Colony: 1, 2, 3 차 획선 증식 - few, some, many

8 시험관 번호 1234 변 또는 희석액의 양 0.1 ml0.4 ml ↓↓↓↓ Thioglycollate 배지 ↓4 ml 희석배수 ↓ (1/100)(1/1,000) ↓ ↓↓ CCFA 배지에 접종 0.1 ml 최종희석 배수 1/10 1/1,0001/10,000 정량배양 방법

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10 비교결과 배양방법 No. samples 정량 반정량 (40 검체 ) NG NG 31 150,000 some 1 280,000 some 1 >1,000,000 many 7

11 요약 (1) 기존 CCFA 862 X 3 = 원 Anaerobic thio = 원 Syringe: 원 Gas: 원 Sheet: 원 Total 원 반정량법 CCFA: 원 Gas: 원 Sheet: 원 Total: 원 건당 원 절감 총 건수 건 / 연 (2002 년 기준 ) 연 원 절감

12 요약 (2) Workload 감소 – 기존 : 약 5 - 10 분, 반정량법 : 1 – 2 분 단점 집락 순수분리 어려움 : 세심한 관찰 필요 - 순수 분리가 잘 안될 경우 blood agar 추가사 용 예상됨

13 결론 정량 배양법과 반정량 배양법 : 비례 업무 단순화를 통한 시간 절약 원가 절감 -> 항균제 유발설사 진단시 유용