Chrom-ID 배지를 이용한 MRSA,VRE,ESBL 균주의 검출

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1 Chrom-ID 배지를 이용한 MRSA,VRE,ESBL 균주의 검출
미생물 파트 윤미경

2 MRSA (Methicillin-Resistant S. aureus)
농양이나 창상감염등 피부감염 뿐 아니라 폐렴, 패혈증 등 중증감염의 원인균인 S. aureus 중에서 penicillin계 항균제인 methicillin에 내성을 보이는 균주 여러 항균제에 강한 내성을 지니고 있어서 선택 할 수 있는 항균제가 제한적임 Contact transmission – 원내감염 위협

3 VRE (Vancomycin-Resistant Enterococcus)
위장관과 생식기의 상재균으로 요로감염, 균혈증, 심내막염, 복강내 감염의 원인균 VRE 1988년 프랑스에서 처음 보고. 그람양성균 감염의 치료에 사용되는 vancomycin에 내성을 보이는 Enterococcus. 여러 항균제에 내성을 보이며 원내감염의 심각한 위협.

4 ESBL (Extended Spectrum ß-Lactamase)
가수분해 효소의 한 종류로 penicillin등의 항균제에 작용하여 ß-lactam고리를 가수분해하여 항균제의 작용을 저해 ESBL 제3, 4세대 cephalosporin을 분해하여 내성을 나타냄. 장내세균에서 흔히 분리됨. (E. coli, K. pneumoniae, ...)

5 본원의 통상적인 검출과정 Work load Time MRSA VRE ESBL (GNR) 접종 (blood agar)
2차 배지 (MSA, DNA, Coa) 감수성 검사 (cefoxitin) VRE 접종 (PEVA) 2차 배지 (SF, BEAA, Man, Tel, Sor, MGP) 감수성 검사 (vancomycin) ESBL (GNR) 접종 (blood agar, MacConkey agar) 2차 배지 (TSI, MIO, Cit, Lys) 감수성 검사 + Double disk synergy test

6 Chromogenic medium

7 Chromogenic medium ChromID MRSA : Cefoxitin
Green of α-glucosidase –producing colonies

8 Chromogenic medium ChromID VRE : Vancomycin
violet of ß-galactosidase (E. faecium) bluish green of α-glucosidase (E. faecalis)

9 Chromogenic medium ChromID ESBL : Cefpodoxime
Pink of ß-glucuronidase (E. coli) Green of ß-glucosidase (KESC) Brown of deaminase (Proteus, Providencia, Morganella)

10 재료 및 방법 MRSA 2007년 7월 5일 심혈관 수술실 의료인의 손,코 등 48검체를 BA와 Chrom ID에 접종하여 MRSA 확인 VRE 2007년 7월 VRE culture 의뢰된 25검체를 Chrom ID에 접종하여 VRE 확인 ESBL ESBL positive 32, ESBL negative 19균주를 Chrom ID에 배양하여 집락의 색확인

11 배양결과 (MRSA) Lab. No. 손 코 BA MRSA agar 1 NG 3 CFU CNS 2 F GNFB
F GNFB (pp) M EAE 3 5 CFU CNS 4 S ECL 5 F CNS 6 7 F CNS, MRSA MRSA 8 9 10 11 12 5 CNS S EAE 13 F EAE 14 15 F MRSA 16 S CNS 17 18 19 S KPN, S CNS F KPN 20 21 F MSSA 22 23 24 S KPN

12 배양결과 (MRSA) 혈액한천배지 Chrom ID MRSA 총 48검체 중 2 검체에서 MRSA가 분리됨
총 48검체 중 18검체에서 Staphylococcus 검출 11검체에서 GNR 증식 Chrom ID MRSA 총 48검체 중 3검체에서 Staphylococcus 검출 2 green colony: MRSA, 1 white colony: MSCNS 1검체에서 GNR 증식 (pinpoint colony) 총 48검체 중 2 검체에서 MRSA가 분리됨 통상적인 방법과 Chrom ID MRSA를 이용한 결과가 일치.

13 배양결과 (VRE) Lab. No. VRE agar Isolation grade Isolation grade test
1 VRE EFM M 2 G 3 NG 4 5 6 P 7 8 9 NG for VRE 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 배양결과 (VRE) Isolation grade test VRE EFM + Good 12 Mod. 8 Poor 1 VRE EFM - 2 NG Total 25

14 VRE

15 배양결과 (ESBL) 균 명 ESBL positive ESBL negative E. coli Pinkish (9)
NG (14) Sl. Brown (1) K. pneumoniae Green (8) NG (4) S. marcescens Green (5) E. cloacae Green (2) White (4) E. aerogenes C. freundii White (1) P. mirabilis NG (1) Total 32 19

16 ESBL

17 ESBL

18 ESBL

19 수가 및 원가분석 환경검사 VRE culture Chrom agar : 2,500원/EA Culture : 3,830원
Culture & Identification : 8,360원 Culture & Identification & Sensitivity : 14,420원 VRE culture 수가 : 9,200원 원가 : 1,800원 Chrom agar : 2,500원/EA

20 요약 및 결론 MRSA, VRE Chrom ID 배지의 결과는 기존 방법과 일치함.
ESBL ChromID 결과는 DDS와 모두 일치하였으나 ESBL 이외의 기전에 의한 내성세균 대상으로 한 추가실험이 필요함. 장점: 검사소요시간 단축, 내성세균 검출에 용이함. 단점: 높은 단가, 짧은 유효기간 여건이 좋지 않은 검사실에서 유용할 것으로 생각됨. 본원의 경우 환경배양검사 및 VRE culture에 적용가능 할 것으로 판단됨.

21 감사 합니다.