혈액학계 양 미숙 * 본과이외의 자료도 포함되어 있습니다.

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1 혈액학계 양 미숙 * 본과이외의 자료도 포함되어 있습니다.
Lupus anticoagulant 혈액학계 양 미숙 * 본과이외의 자료도 포함되어 있습니다.

2 임상적 의의 SLE환자에서 처음 밝혀진 antiphospholipid autoantibody 양성인 경우
혈전증 혈소판 감소증 반복 유산 등의 위험 인자로서 간주됨. Phospholipid에 결합한 prothrombin이 target

3 검사 원리 Lupus Anticoagulant (LA) LA confirmatory test
Phospholipid dependent한 응고 검사(APTT, Direct Russell’s Viper Venom Test)를 prolong → LA screening test LA confirmatory test 과량의 phospholipid를 사용 LA를 중화 → 응고 시간이 단축 다른 coagulation inhibitor는 그대로

4 검사 단계 phospholipid dependent 응고검사 (APTT, dRVVT)의 연장 확인
mixing test(coagulation inhibitor 확인) 혈소판이나 phospholipid 추가 → screening test의 correction 확인 다른 응고이상질환을 배제하는 단계(heparin, factor VIII inhibitor)

5 Screening Screening test: 다양한 민감도, 특이도 Kaolin Clotting Time
시약내 phospholipid 추가 없으며 PPP 검체 사용 민감도가 매우 높다 임신에 동반된 LA의 검출이 용이 검사실 간에 일관성 있는 결과 자동화가 어렵고 검체 내 혈소판에 의한 간섭

6 Screening Russell’s Viper Venom (RVV) factor X을 직접 activation
contact factor 결핍, inhibitor에 영향 받지 않는다. Diluted RVV Test (dRVVT) 자동화가 용이 RVV 제조 과정의 표준화가 어렵고/제조된 venom의 성상이 다양/첨가된 phospholipid 농도나 성상에 많은 차이 → 시약간 검사결과 차이가 심하다. IL LA screen은 whole venom을 사용

7 Mixing Screen test prolongation의 원인 분석 첫 단계 검체 내 heparin이 있는지 확인
Normal pooled plasma 혈소판은 LA 중화 혈소판 오염을 최소화 하여야 한다. LA는 immediate type inhibitor

8 Confirm LA의 phospholipid specificity를 확인 Phospholipid source
과거엔 혈소판 사용 권장 현재: 정제phospholipid mixture (phosphatidylserine, phosphatidylethanolamine), 합성 phosphatidylserine , rabbit brain thromboplastin 등 사용 혈소판내 platelet factor 4, factor V → heparin, factor V inhibitor에 의한 LA 위양성

9 Differential 마지막 단계 다른 혈액 응고 질환을 배제
factor activity 검사나 factor inhibitor 검사 Factor inhibitor에 의한 LA 위양성 감별 (I.e. 혈우병 환자가 AIDS에 감염과 관련되어 LA 양성인 것 처럼 나타날 수 있다) LA에 의한 factor inhibitor 위양성 결과 가능

10 Sensitivity, specificicty and false positivity of various dRVVT methods
Test specimen DVV test (ADI) Bioclot LA (Biopool) LA screen (IL) Viperquik (OT) LA screen (Gradipore) Manchester Unicorn (UDL) LA-positive 96% 100% 87% Heparin-ex vivo 25% 10% 15% 95% Oral anticoagulant 45% 30% 75% 80% 85% Factor VIII inhibitor 43% 7% 50% 29% 64% Haemophilia A 9% 0% 8% 27% Haemophilia B Sensitivity Specificity 73% 62% 60% 51% 48%

11 우리는?

12 검체 검체 종류: 피검자 검사전 준비사항 3.2% Sodium citrated platelet poor plsma
Icteric,lipemic,용혈 검체는 검사에 영향을 미칠수 있다. Heparin 투여 환자의 12%에서 screen 위양성 검체보관 실온에서 4 hrs 장기간 보존시 -20℃

13 검사 장비 및 시약 ACL 3000 Screen Confirm lyophilized Russell’s viper venom
Phospholipid (vegitable) calcium,polybrene,buffers,stabilizers,dyes Confirm lyophilized Russell’s viper venom phospholipeds(과량) calcium,polybrene,buffers,stabilizers, dyes 실온 (15 ~25℃) :24hr 냉장보관 (2~8℃) :48hr 냉동보관 (-20℃) :1개월간 stable

14 검사 방법 및 보고 I ACL 3000으로 extended Thrombin time mode로 clotting time 측정
Screen Normal range: < 39.0 sec Screen ratio Pt screen results(sec) mean normal screen result(sec) Screen positive면 confirm test로 넘어간다.

15 검사 방법 및 보고 II Confirm Confirm ratio
Pt confirm results(sec) normal confirm result(sec) Normalized LA ratio Screen ratio confirm ratio >=1.3 … LA positive 1.2~<1.3 … LA weakly positive <1.2 … LA negative

16 정도 관리 정상 정도 관리 IL Test Normal Plasma 비정상 정도관리
home made pooled LA positive plasma