TB Ag MPT64 미생물파트 이유희 2008.12.04.

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1 TB Ag MPT64 미생물파트 이유희

2 결핵 진단을 위한 검사법 객담 도말검사 배양검사 중합효소 연쇄반응(PCR) 조직검사 흉부 X-RAY

3 결핵 검사 흐름도 RT PCR 배양검사 Niacin test, MTB ID PCR MTB NTM
양성 활동성 결핵 의심 배양 검사 or RT PCR 시행 음성 배양 검사 시행 객담도말검사 (AFB Stain) 양성 활동성 결핵 의심 배양 검사로 확진 음성 배양 검사 시행 RT PCR 배양검사 Niacin test, MTB ID PCR MTB NTM

4 결핵 배양 검사 검사방법 배지에 검체 접종하여 약 6~8주 배양하여 양성, 음성 결과 판독 배지종류 고체배지
1. 3% Ogawa 배지를 사용 배양 뒤 육안 판독하여 Niacin test로 MTB 와 NTM 동정 SD TB Ag 키트 이용하여 TB 양성, 음성 판정 가능 액체배지 1. MGIT 960 액체배지 사용 2. MTB ID PCR 이용하여 MTB 와 NTM 동정 SD TB Ag 키트 이용하여 TB 양성, 음성 판정 가능 검사결과 양성 기존 : Niacin test, MTB ID PCR으로 MTB, NTM 구분 1~2주 소요 SD TB Ag : 15분 안에 MTB, NTM 구분 가능

5 배 경 3% Ogawa에서 배양 양성 => Niacin test MGIT 960에서 배양 양성
배 경 3% Ogawa에서 배양 양성 => Niacin test MGIT 960에서 배양 양성 => MTB ID PCR 기존 결핵균 동정 방법의 결과 지연 TAT 향상 요구

6 SD TB Ag 사용 시점 SD TB Ag 객담도말검사 (AFB Stain) PCR RT PCR 배양 검사 배양 검사
Niacin test, MTB ID PCR SD TB Ag TB NTM TB NTM

7 SD TB Ag 방법 MPT 64 Ag 3% ogawa 에서 배양된 균주 =>2 colony + buffer 150 ul
24 kDa의 secretory protein 결핵균이 분비하는 단백질 항원 중 하나 M. bovis BCG Tokyo의culture filtrate에서 처음 분리 3% ogawa 에서 배양된 균주 =>2 colony + buffer 150 ul =>100 ul 주입 =>15분 후 판독 MGIT 960 에서 배양된 균주 =>1000 ul 원심 분리 후 sediment 100 ul 주입 =>15분 후 판독

8 SD TB Ag 결과 판독

9 기존 검사와 SD KIT 비교 재 료 2008년 3월 ~6월 사이 의뢰된 배양 양성 균주 50주
재 료 2008년 3월 ~6월 사이 의뢰된 배양 양성 균주 50주 => 3% ogawa: MTB 19주, NTM 6주 MGIT 960: MTB 15주, NTM 10주

10 기존 검사와 SD KIT 비교 결 과 민감도 : 97 % 특이도 : 100 % Niacin SD TB 19 NTM 6
MTB ID PCR 특이도 : 100 % 15 14 10 11 MGIT 960 에서 배양된 균주 1주 불일치

11 SD TB Ag 위음성 원인 PCR 보다 감도가 낮다. Weakly pos->negative로 판독 혼합배양
MPT 64가 분리 안되었을 때 검체의 돌연변이(호주) PCR 의 위양성

12 SD TB Ag 장점 SD TB Ag 의 장점 SD TB Ag 이용시 병원의 Benefit
1. 진단에 별다른 장비가 필요없다. 기존 검사 에 큰 변화없이 NTM과 TB를 구분할 수 있다. 2. 민감도와 정확도가 뛰어나다. PCR, 생화학적 검사등 복잡함 없이 TB 확진이 가능하다. 3. 배양액, Colony 등 검체를 가리지 않는다. 액체 배지로도 검사 가능하므로 고체배지 이용할 때보다 더 빠르고 정확한 진단이 가능하다. 4. 검체에 Buffer 첨가만으로 검사 가능 PCR과 달리 검체의 후처리 없이 즉석에서 결과 판정이 가능 5. 검출 한도가 10^5CFU/mL 이다 한 두개의 Colony 로 검사가능. 검사시 특별한 테크닉을 요구하지 않고 검사술식이 간편하다. 6. 실온 보관이므로 보관이 간편하다. NTM의 비율증가로 더 정확한 검사결과를 필요로 하는 검사 추세를 간편히 따를 수 있다.

13 원가 비교 Niacin test =>건당 25원 x 월평균 100건=2,500원 MTB ID PCR
SD TB Ag Kit =>건당 6,050원 x 월평균 140건=847,000원 월평균 추가비용=> 539,000원 (현재는 고체배지 균주만 사용중)

14 결 론 결핵 환자의 신속한 진단 및 치료 가능 결핵균 검사의 TAT 향상 비용 증대