염증성 장 질환(Inflammatory Bowel Disease: IBD)에서

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1 염증성 장 질환(Inflammatory Bowel Disease: IBD)에서
ASCA(Anti-Saccaromyces cerevisiae Ab) 검사 2002 년 10 월 24 일 진단검사의학과 혈청학계 한 윤 숙

2 크론병 궤양성 대장염 역 학 (Crohn’s Disease) (Ulcerative Colitis) 미국,영국, 스칸디나비아
등 빈도 높음 우리나라에서는 육아종성 장결핵과 유사하여 진단이 어려움 인구 10만명 당 20- 40명으로 최근 증가하는 추세 20~25세 노인과 어린이에서도 발생 인구 10만 명당 명 최근 증가하는 추세 (1986~1988년 매년 새로 진단된 환자의 수가 인구 10만 명당 0.2, 1995~1997년 인구 10만 명당 년 사이 6배 증가) 1997년말 현재 질환중인 환자의 총 인원- 인구 10만 명당 7.6명 정도

3 크론병 궤양성 대장염 호 발 부 위 임 상 증 (Crohn’s Disease) (Ulcerative Colitis)
직장-항문부위 (말단 회장부) 소장, 대장등을 포함한 모든 소화기관 대장에 국한적 임 상 증 간헐적 설사 발열 우하복부 국한적 통증 간혹 우하복부 종괴 촉지 출혈성 설사, 점액성 설사, 고열 대변 배설 후 하복부 통증,경련 독성 거대결장(급성 침습시 장기 능의 소실로 인함) 수분 및 전해질 대사 이상

4 크론병 궤양성 대장염 육 안 소 견 (Crohn’s Disease) (Ulcerative Colitis) 아프타 모양의 궤양
Cobblestone mucosa (부종과 진행된 궤양으로 인해 정상점막이 밀려 조약돌 모양 형성) String sign (진행되면서 장벽 전층의 섬유성 비후, 내강 협착) Skip lesions (분절성 침범, 동시다발적 궤양으로 건너 뛰기 형태) 화농이 점막하에서 옆으로 확산 점막을 파고들어가며 수많은 원형, 타원형모양의 궤양형성 Pseudopolyposis (연속적 궤양부위끼리 융합되어 폴립의 형태를 취함) 연속적이며 진행적인 궤양

5 크론병 궤양성 대장염 조 직 학 적 소 견 (Crohn’s Disease) (Ulcerative Colitis)
점막 궤양과 더불어 점막 에서 장막까지 전층의 만성 염증, 섬유성 비후 * 비건락성의 유상피세포의 육아종 열구(Fissure)- 근육층 및 장막층까지 길고 좁은 궤양을 형성할 떄 발생 장샘 농양과 근층까지 연장된 궤양 1. 급성 결장염-점막의 심한 울혈과 출혈 배상세포의 감소, 상피의 괴사와 재생 2. 완해중 결장염- 혈관의 감소, 배상세포의 회복, 상피의 재생, 3. 완해기 결장염   비활성 결장염- 장샘의 수적 감소, 만성염증세포의 침윤, 점막근층 의 비후, 분절 현상

6 크론병 궤양성 대장염 예 후 (Crohn’s Disease) (Ulcerative Colitis) 절제술 이후 재 수술율
- 5년이내 재 수술율 40% - 15년이내 재 수술율 85% 소장 등의 절제술이 반복 적이다보면 소화기능의 비정상화로 인한 합병증 예상 반복적 염증과 수복의 과정을 통해 다른 부위보다 더 침윤적이 고 다발성인 암종으로의 변화 가능 대장염 때문에 암의 증세와 소견 이 가려지기 쉬워 조기 발견이 어렵고 수술이 불가능한 경우가 많아 예후가 불량함

7 염증성 장 질환의 진단 1. Barium enema 2. Abdominal CT scan
3. Mesenteric angiography 4. Nuclear medicine scans 5. Colonoscopy 6. Serological test Ulcerative colitis- Anti-intestinal goblet cell Ab, p-ANCA 등 Crohn’s disease- ASCA, Anti-pancreas acini Ab 등

8 우리병원에서 시행한 ASCA 검사 제품- Euroimmune Antibodies against Pancreas acini,
Intestinal goblet cell, Saccaromyces cerevisiae and Granulocyte: instructions for the immnofluoresence test (Luebeck, Germany) 시약가- 1 Kit/100 Test = 원 1건당 원 제품 상태- Slide 상에 냉동된 췌장의 분비조직, 소장조직, Granulocyte, Saccaromyces cerevisiae 부착됨 검사원리- 간접 면역 형광 염색법

9 ASCA 검사 술식 1. 검체- 혈청은 PBS-Tween Buffer 에 희석 (Ig G 는 10배,
Ig A 는 100배) 25ul 사용 2. 술식 검사 전 처리- 냉동된 모든 시약은 사용 직전 실온으로 Warm Up Slide 에 희석된 검체 25ul분주 - 30분 실온반응 - Wash - Fluoresein-labelled Anti-human Ab conjugate 20ul 분주 - 30분 실온 반응 – Wash – Embedding medium으로 Mounting – 형광현미경으로 검경

10 ASCA 검사 결과 판정 정도 양성 반응 * Laminar epithelial mucosa 의 배상세포 세포질에 형광패턴
  ► Anti- intestinal goblet cell Ab 는 궤양성 대장염 환자에서 28% 정도 양성 반응 * Laminar epithelial mucosa 의 배상세포 세포질에 형광패턴 ► Anti- pancreas acini Ab 는 크론병에서 39% 반응, 췌장의 분비조직에서 망상 또는 방울진 모양의 미세망상구조의 형광패턴 ► p- ANCA 는 Granulocyte 의 핵주변 세포질에 리본모양의 형광패턴, 궤양성 대장염환자에서 57%, 크론병에서 7%  ► Anti – Saccaromyces cerevisiae Ab 는 구형의 Yeast 모양의 형광패턴, 크론병에서 50~60%

11 형광현미경상 양성 반응 Fig. 1. APA 및 Anti-goblet cell Ab 양성 사진

12 형광현미경상 양성 반응 Fig. 2. ASCA 와 p-ANCA 양성 사진

13 우리 병원에서의 ASCA 검사 대상군 (총 33명) 우리 병원에서 크론병으로 진단 받은 환자- 8명,
궤양성 대장염으로 진단 받은 환자- 25명

14 우리 병원에서의 ASCA 검사 결과 ASCA P-ANCA 양성 음성 크론병(n=8) 4 1 7 궤양성 대장염(n=25) 6
Table 1. 대상군에서 ASCA 검사와 p-ANCA 검사 결과 ASCA P-ANCA 양성 음성 크론병(n=8) 4 1 7 궤양성 대장염(n=25) 6 19 14 11

15 민감도 및 특이도 통계 Sensitivity Specificity PPV NPV ASCA양성 (CD) 50% (4/8) 76%
Table 2. ASCA 검사와 p-ANCA검사의 민감도 및 특이도 Sensitivity Specificity PPV (양성 예측률) NPV (음성예측률) ASCA양성 (CD) 50% (4/8) 76% (19/25) 40% (4/10) 83% (19/23) p-ANCA양성 (UC) 56% (14/25) 88% (7/8) 93% (14/15) 39% (7/18) ASCA + / p-ANCA - 92% (23/25) 67% (4/6) 85% (23/27)

16 결 론 ◈ 염증성 장 질환에서 p-ANCA와 ASCA 검사는 민감도가 낮아 진단적 검사로서의 유용성은 떨어지나,
결 론 ◈ 염증성 장 질환에서 p-ANCA와 ASCA 검사는 민감도가 낮아 진단적 검사로서의 유용성은 떨어지나, 염증성 장 질환의 분류에 있어서는 이들 혈청학적 검사가 도움이 되고, 특히 ASCA와 p-ANCA 검사결과의 조합은 크론병과 궤양성 대장염의 감별 진단에 있어 중요한 가치를 갖는 것으로 생각된다.