Pipette의 사용법과 Buffer의 용량 계산법 기초생명과학 및 실험 7주차
Pipette이란? Pipette 실험 Buffer의 용량 계산법
Pipette이란 ? 액체의 일정량을 가하거나 꺼내는 기구 Micro pipette 범위는 1 - 1000𝑢𝑙
Plunger button with volume adjustment Tip ejector button Volume adjustment knob Digital volume indicator Stainless steel ejector arm Polypropylene disposable tip
Plunger button with volume adjustment Plunger button은 Plunger를 위, 아래로 움직이도록 손으로 누를수 있는 버튼, 피스톤 역할을 하는 장치 최소범위부터 최대범위 까지를 확인 할 수 있음 Volume adjustment knob Micro Pipette으로 취할 액체의 양을 정해주는 장치 Digital volume indicator Polypropylene tip 안으로 빨아들일 액체의 양이 표시되는 부분 Polypropylene disposable tip 간단하게 Tip이라고도 부름
Tip ejector button & Stainless steel ejector arm Ejector button을 누르면 자연스레 stainless steel ejector arm이 plastic shaft를 타고 내려오면서 tip을 밀어내어 MicroPipette으로부터 제거 ★ Digital volume indicator 1 2 2 100-1000𝒖𝒍 Pipette 20-200𝒖𝒍 Pipette 2-20𝒖𝒍 Pipette
Pipette 실험 첫 번째 실험 두 번째 실험 1. EP tube를 준비한다. 2. 70% EtOH 1ml, DW 1ml 씩 tube에 옮긴다. 3. 70% EtOH 1ml과 DW 1ml 볼륨을 비교해 본다. 두 번째 실험 DW를 1ml로 한번과 200𝑢𝑙 x5번을 각각 Tube에 옮긴다. 2. 저울을 이용하여 두 tube의 질량을 측정한다.
Pipette 결과 예상 ★Volume의 비교 70% EtOH ( < , > ) DW DW 1000𝒖𝒍 1번 ( < , >) DW 200𝒖𝒍 𝟓번
Buffer의 용량 계산법 퍼센트(%) 농도 용액 100ml 속에 녹아있는 용질의 질량(g) = (용질의 질량 / 용액의 질량 ) x 100 = (용질의 질량 / (용매 + 용질)) x 100 용질의 질량(g) = (용액의 질량 x % 농도) / 100
몰 농도(M) n = w / Mt 용액 1L 속에 녹아 있는 용질의 몰(mole)수 1 몰(mole)은 분자량에 g을 붙인 값 즉, 1M 수산화 나트륨(NaOH, m.w=40) 용액인 경우는 물 1L에 수산화나트륨 40g을 녹이면 됨 부피가 V (L)인 용액에 녹아 있는 용질이 n몰이라면 이 용액의 몰농도(M)는? 용액 V(L)에 녹아있는 용질이 w(g)이고 용질의 분자량이 Mt라 하면 용질의 몰수 n = w / Mt
농도의 전환 고체인 수산화나트륨 1M 용액인 경우는 물 1L에 수산화나트륨 40g을 녹이면 쉽게 몰용액을 만들 수 있지만 연산과 같이 %농도일 경우의 약품은 이를 퍼센트 농도를 환산하여 몰농도로 만들어 주어야 함 % 농도를 몰 농도로 환산하기 농도가 a%, 밀도가 d g/cm3, 용질의 분자량이 Mt인 용액을 몰 농도(M)를 구하는 방식 용액 부피가 1L일 경우 이 속에 있는 용액의 질량 = 부피 x 밀도 = 100ml x d(g/cm3) = 1000d (g)
당량농도 어떤 양성 원소와 결합할 수 있는 화합물의 중량, 즉 당량으로 나타낸 농도를 말한다. 여기서 한 화합물의 분자량을 양이온의 산화수로 나눈 값과 같음 원소의 당량 = 원자량 / 원자가 적정을 이용한 정량분석 실험에 있어서의 용액의 농도는 당량농도이다 화 합 물 1몰(mole) 1g 당량 원자가 염산(HCl) 36.5 1 황산(H2SO4) 98 49 2 수산화나트륨(NaOH) 40 수산화칼슘 (Ca(OH)2) 74 37 탄산나트륨(Na2CO3) 106 53
용질, 용매 용액의 뜻 용질 : 어떤 액체에 녹아드는 물질을 말함 용매 : 어떤 물질을 녹이는 물질을 말함 용액 : 용질과 용매의 혼합액이라고 함 포화 : 용질이 용매에 더 이상 녹지 않을 만큼 최고로 녹아있는 상태를 말함 용해도 : 용질이 포화에 이를 때까지 용매에 녹는 양을 말하는데, 물질에 따라서 혹은 온도에 따라서 또는 용매에 따라서 용해도는 차이가 있음