혈액 ,수혈 실습 계획서 14102946 김동윤

진공채혈 (Vacutainer) ,EDAT tube 0. 환자의 이름 /인적사항 / 바코드 확인 손 소독하기 / 장갑착용 터니켓 (압박대) 묶기 /혈관확인 준비한 vacutainer에 neddle 장착 천자부위 소독하기 피부면 10~15도 채혈 진공관 고정 후 EDTA Tube 삽입 (2개) 필요량 채혈후 tube 제거후 /니들제거 알코올솜 대준후 5분 지혈 실시

CBC 검사 하기 /ESR , PBS 검사 항목 WBC (백혈구) RBC (적혈구) Hb (hemogolbin , 헤모글로빈 혈색소) Hct (hamatocrit ,적혈구용적률) MCV (평균적혈구 용적) MCH (평균적혈구 혈색소량) MCHC (평균 적혈구) RDW (적혈구 크기분포) Platelet (지혈,응고 역할) ESR (적혈구 침강속도) PBS (말초혈액 도말)

항목 참고치 임상적 의의 WBC 4.0~10.0 x103/㎛ RBC 4.2~6.3 x 백만/㎛ Hb 13~17 g/dL Hct ▲급성감염 , 홍역, 외상 , 백일해 , 악성종양 , 순환 장애 ▼세균감염, 약이나 급성 백혈병 등에 의한 골수 기능저하 RBC 4.2~6.3 x 백만/㎛ ▲ 심한 설사,탈수,다혈구혈증, 급성 약 중독, 폐 섬유증 ▼ 용혈성빈혈,빈혈, 출혈 , 에디슨병, 류머티스열, 백혈병 Hb 13~17 g/dL ▲만성 폐색성폐질환, 울혈성 심부전 , 다혈구혈증 ,탈수증 ▼ 갑상선항진증, 빈혈 , 간경화 , 심한출혈, 혈액희석 Hct 39~52 % ▲ Erythocytosis, 탈수 , 다혈구혈증, 체액손실 ▼ 갑상선 기능 항진증 , hemolysis anemia of pregnancy ,acue massiveblood loss 빈혈 ,백혈, 실혈 MCV 81~ 96 fL (평균적혈구용적) Macrocytic, Normocytic , Microcytic의 구별 MCH 26 – 33 pg (평균 적혈구 혈색소량) MCHC 32 – 36 % (평균 적혈구 혈색소 농도) RDW 11.5 ~ 14.5 적혈구 크기분포 Platelet 130~400 x103 /㎛ 지혈작용, 혈액응고역할 ▲ 외상 , 심장병, 만서췌장염, 비장절제술 , 결핵 ▼ 바이러스감염, 폐렴, 알러지 ,급성백혈병 , 재생불량성 빈혈 , 용혈장애 , DIC , 특발성혈소판감소성자반증 , AIDS PCT 0.15 ~ 0.32 Pletelet crit : 특발성 PLT감소성 자반증 등 출혈질환 감별 MPV 7.4 ~ 10.4 fL 평균 혈소판 용적 : 증감시 골수이상 ,백혈병 , 재생불량성 빈혈 , 혈소판이상 , 비장이상

ESR 측정 임상에서 흔히 사용하는 지표 항응고제를 첨가한 시험관에 혈액을 넣고 세워두면 적혈구의 비중이 무겁기 때문에 가라앉는다.이를 “ESR 적혈구 침강속도” 라고 한다. 남성 2~10 mm/hr 여성 3~15 mm/hr 어린이 0.5~20 mm/hr 임신 35mm/hr까지 증가 (임신아닌데 20~35면 병적 증세) 결핵 ,패혈증, 암같은 병적상태에서 혈구가 잘뭉치기 때문에 침강속도가 65~100mm/hr 까지 상승  항진 → 악성종양, 혈액질환(다발성골수종, 악성림프종, 재생불량성빈혈, 급성백혈병), 급성/만성감엽증, 교원병, 간질환   지연 → 다혈증, 파종성혈관내응고(DIC) 저섬유소원혈증

PBS Slide / wright stain 말초혈액을 채혈하여 유리슬라이드에 도말한 후 염색하여 현미경으로 혈구의 수적. 형태학적 이상을 관찰하는 검사 Wright Giemsa stain 1. Wrigh염색을 한다. (3~5분) 2. 완충액을 올려놓고 (2~3분) or 곧바로 세척 3. Giemsa 염색으로 10~20분 염색후 세척 후 건조 준비물 :   Wright stain   - 생리식염수   - Glacial Acetic Acid   - Crystal

- Wright powder 3g, Glycerin 30mL 유발에 넣고 갈아준다. 37℃ 배양기에 수일간 방치한다. 가끔 꺼내서 갈아준다. Acetone free methanol 1,000mL를 가하고 혼합 후 갈색병에 넣어 2주정도 보관하였다가 사용하나 사용직전 반드시 여과를 한 후 사용 제조회사에 따라 Wright powder에 포함되는 염료들의 구성성분이 달라 염색성에 차이가 있으므로 선택에 유의 하여야 한다. 최근에는 상품화된 것을 많이 사용하고 있으며 미국과 유럽 등 선진국에서는 May-Grundwald-Giemsa satian 혹은 Wright-Giemsa stain액을 더 많이 사용하고 있다. (2) 완충액의 조제( Sorensen buffer pH (6.4~6.6) 1/15M 인산완충액 조제: A액: Potassium phosphate monobasic(KH₂HPO₄): 9.07g을 증류수(CO₂를 제거하기 위해 끓여서 사용하면 좋다)를 넣어서 용해시키고 1L 로 만듬 B액: Sodium phosphate dibasic(Na₂HPO₄): Na₂HPO₄ 9.47g을 증류수(끓여서 사용하면 좋다)를 넣어서 용해시킨 다음 1L로 만든다. A액과 B액을 다음과 같이 혼합하면 구하는 pH를 얻을 수 있다. PH (A) KH2Hp4(1/15M) (B) Na2Hp4 (1/15M) 6.4 75.4 ml 24.6 ml 6.6 65.3 34.7 6.8 53.4 46.6

WBC, RBC , platelet count WBC count ( 11−1 0.5 x 10 x WBC값 𝑋 1 4 ) RBC count ( 101−1 0.5 x 10 x RBC값 X5)

Newbauer chamber 대구획 중구획 소구획 http://blog.naver.com/gusrudapdl/140212316012

ABO, Rh 혈액형 검사(혈구형, 혈청형) 혈 구 형 (Cell type) 혈 청 형 (serum type) 혈액형 0. 환자의 이름 /인적사항 / 바코드 확인 손 소독하기 / 장갑착용 터니켓 (압박대) 묶기 /혈관확인 준비한 vacutainer에 neddle 장착 천자부위 소독하기 피부면 10~15도 채혈 진공관 고정 후 EDTA Tube 삽입 (2개) 필요량 채혈후 tube 제거후 /니들제거 알코올솜 대준후 5분 지혈 실시 혈 구 형 (Cell type) 혈 청 형 (serum type) 혈액형 Anti-a Ant-b Anti-d A-cell B-cell A O X Rh(+,-) B AB

Cell typing / Front typing (혈구형) 0.채혈 후 검체를 3400rpm 혈구형,혈청형 분리 (5분) 1. Slide법   ① Slide glass에 A와 B를 구분 ② anti-A, anti-B 혈청을 각각 1 drop씩 적하시킨다. ③ 피검혈액을 항혈청에 적하 후 로 섞는다. ④ Slide를 전후좌우로 기울여 반응을 촉진시킨 후 2분 이내에 판독한다. 2. Tube법 ① tube에 anti-A, anti-B 혈청을 1 drop씩 적하 ② 2~5% 혈구부유액을 각각 1 drop씩 적하 ③ 응집력을 높이기 위해 3400rpm에서 15초간 원심분리

Serum typing / Back typing (혈청형) 1) 검체를 혈구와 혈청(혈장)으로 분리하기 위해 3400rpm으로 5분 동안 원심분리 2.생리식염수와 검체 혈구를 가하여 혼합 (1:9 비율) (ex 혈구 10ml , 생리식염수 90ml) 3) 슬라이드에 항 A혈청, 항 B혈청을 1~2방울을 떨어뜨리고 만든 10% 혈구 부유액을 1방울 가한다. (가장 좋은 항원 항체의 비율 // 항원 : 항체 = 1 : 2 ) 4) 항혈청과 피검혈구를 나무봉 (wood applicator)등으로 혼합하고 2분 이내에 판정 (serofuge시 3400rpm 15초)

아형 만들기 (항원,항체 조절) 1)weak A 또는 weak B 적혈구에는 A형 또는 B형 항원이 약 100만개 정도 있는데 이보다 항원수가 적은 적혈구를 갖는 경우 weak A 또는 weak B 로 표현 A형 또는 B형은 O형으로 판정될 수 있게 만들어볼 예정입니다.