3주차 감염병 진단

검체의 취급 검체 취급 시 부주의으로 인해 의사나 간호사의 손 혈관, 외피 또는 그것과 수반되는 검사용지 검체용 기 를 오염시킬 수 있다 검체를 채취하거나 다룰 때 장갑, 마스크, 보안경, 실험복 등과 같은 적절한 개인보호장구를 착용하 여야 한다.

미생물 검사의 일반적 주의사항 발열초기, 항균제 투여 이전에 채취한다 검체는 반드시 감염이 있는 부위에서 채취하여야 한다 검체 용기는 무균적이고 무균 조작법을 사용하여야 한다 검체 채취후 신속하게 미생물 검사실에 보낸다 검체량은 적정량(가능한 많이 채취한다)

정상균 무리와 소독약의 혼입 방지 정상균 무리와의 혼입은 균의 동정을 어렵게 한다 채취 부위에 쓰인 소독약이 검체속에 소독약이 섞 이지 않도록 주의한다. 인체에 상재하는 정상균무리 중에는 때로 병원균이 될 수 있는 세균이 섞여 있어 이를 감염병의 원인균으로 오판할 우려가 있고 여러가지 세균이 공존하는 경우가 많아서 정상균무리를 피해 채취하는 것이 중요하고 이를 검사하기 위해 지연되는 수도 있기 때문이다.

검체 채취 수송 보존시 주의사항 검체 채취용기는 재질이 튼튼해 파괴되지 말아야 하고 검체 를 밀봉할 수 있어야 한다 일반적으로 면봉은 공기를 포함하므로 혐기성균은사멸하기 쉽다 . 면봉의 축이 목재인 것은 일부 세균과 바이러스 에 유해하다고 한다 이러한 균들의 검사에는 플라스틱제와 알루미늄제인 것이 권장 된다 채취후 다른 검사시설 등에 수송하는 경우 또는 휴일 등으 로 즉시 검사할 수 없는 경우에는 수송용 배지나 특수용기 를 사용한 것이 좋다 검체를 보관할 용기는 모두 뚜껑이 있는 것을 멸균하여 사용한다.

검체 건조 방지 건조하면 대다수의 미생물은 사멸한다 .객담, 소변, 대변 등은 정상균무리가 들어 있으므 로 실온에 방치해두면 검체 내의 세균이 증식하고 혐기성 세균이 감소하므로 주의하여야 한다. .

검체의 실온 방치 금치 검체는 배지의 역할을 하기 때문에 검체의 실온방 치는 균이 증식해 성적을 잘못 파악하게 한다 검체보존은 냉장보관이 원칙

혈액 여러 종목의 검사를 위하여 동시에 채혈할 때는 채혈량을 미리 계산해두어야 한다.(10~20ml) 정상균무리에 의한 검체의 오염을 줄이기 위해 소독한다 채혈된 혈액은 제일 먼저 항응고제가 들어있지 않는 튜브에 분주하고 다음으로 항응고제가 들어있는 튜브에 분주한 다.-혼합시 응고 주의

소변 소변을 조금 방출 시킨 후 중간 소변을 채취한다. 질, 요도, 외음부의 정상균무리가 오염되는 것을 방지하기 위해서 카테터를 방광 내에 삽입하여 무 균적으로 채취할 수 있다 요도염에 대한 병원미생물을 검사할 때는 중간 소 변보다 전반 소변이 검출률이 높다. 정상균무리가 소변에서 증식할 수 있으므로 실험 실로 즉시 운반 하는 것이 바람직하나 즉시 배양할 수 없다면 냉장고에 보관하거나 정상균무리 발육 을 억제할 수 있는 세균 발육 억제제를 첨가하여 야 한다.

분변 분변시료는 단단하게 밀봉된 방수용기에 담아야 하고 균 대사에의해 생기는 분변 내 산도 변화를 막기 위해 신속하게 운반하여야 한다. 운반상 지연이 예측된다면 분변은 글리세롤이 함 유된 인산 완충용액과 같은 보존제와 섞고 Campylobacter감염이 의심되는 경우에는 Blair운 반배지와 섞는다 Shigella같은 균에게는 위음성을 초래할 수 있다.

뇌 척수액 요추천자 전에 환자 피부를 알코올이나 요오드로 소독하고 무균조작을 통해 시료를 멸균된 시험관 에 채취한다. 세균성 뇌막염은 진단이 늦어지면 높 은 사망률을 보일 수 있는 질환이며 수막염균, 폐 렴연쇄상규균과 같은 일부 병원체는 배양되지 않 은 경우가 많으므로 뇌척수액 시료가 확보되자 마 자 즉시 배양을 해야 한다. 냉장보관이나 열처리는 세균이 사멸될 수 있으므 로 피해야 하며 검사하기 전에는 가급적이면 37℃ 배양기에 보관되도록 한다.

상기도 인두에서 시료를 채취하기 위해서는Dacron이나 calcium alginate swab을 사용한다. 편도, 인도 뒷편 삼출액 및 궤양 부위에서 시료를 채취하며 이때 침에 의해 시료가 오염되지 않도록 주의한다. A군 연쇄상구균, 디프테리아균은 건조에 대한 저 항성이 크므로 실험실로 운반될 때 특별한 주의가 필요하지 않으나 백일해균이나 임균이 든 시료는 시료 수집 즉시 배지에 접종하여야 한다. 클라미디아 Mycoplsma pneumoniae는 특수배지 내에 넣어 운반하여야 한다.

하기도 하기도의 미생물 감염 검사는 주로 객담 검사를 통해 이루 어진다 객담의 수집이나 기관지경 검사나 경기관 흡인, 직접적인 폐 흡인을 통해 시료를 채취 대부분 하기도 병원균은 2~3일 내에 성장한다. 만약 결핵 균과 같은 미코박테리움에 의한 감염이 의심되는 경우에는 특수 배양법과 항산성염색을 사용해야 한다.

상처, 농양 및 조직 . 동물이나 사람에 의한 교상, 화상, 절단 또는 이물질에 찔림과 같은 외상에 연관된 감염과 관련된 병원체를 찾기 위해서는 조심스럽게 검체를 채취한다. 창상감염의 농양 배양은 정상균 무리의 균주들로 쉽게 오염되기 때문에 잘못된 결과를 나타낼 수 있다. 농양에는 호기성 균이외에 혐기성 균도 상당한 빈도로 검출 될 수 있으므로 시료의 일부는 혐기성 균을 배양항ㄹ수 있는 전용 용기 및 배양배지를 이용하여 검사를 진행한다

다른 일반 무균 체액 감염성 질환이 의심되는 경우에는 세균 배양을 위 해 복막, 흉막, 활막, 심내막의 체액을 수집한다 이러한 체액들은 배양배지가 든 무균 시험관에 접 종하여 미생물을 배양하거나 염색을 통해 균의 감 염 여부를 확인할 수 있다

바이러스성 감염에 의한 검체 바이러스 감염이 의심되는 경우, 검체 채취는 증상 이 나타난 후 가능한 한 신속하게 하여야 한다. 검체에서 바이러스를 배양하여 진단할 수 있는 최 대 기회는 증상 발현후 최초 사흘 이내이며 닷새가 경과하면 그 가능성이 급격히 감소한다. 부검으로 검체를 취할 때는 사망 즉시 하여야 한다. 채취한 모든 검체는 가능한 한 신속히 검사실로 보 내야 하고 시간이 지체될 때에는 냉장보관 하여야 하며 절대 냉동고에서 얼려 보관하지 않도록 한다. 검사할 때까지 장시간을 기다려야 할 경우에는 영 하 70℃ 이하에서 동결 보존한다.

병원체 진단 및 동정 검체의 육안 관찰 및 전처리 채취한 검체는 먼저 육안 관찰을 통해 시료의 상태 관찰 척수액이나 소변 → 색과 혼탁도, 침전물 유무, 혈 액의 혼합유무 객담 → 농성 , 점액성, 타액량, 혈액유무 대변 → 변의 상태

도말검사 직접검사 분별염색 항산성 염색 형광 염색

배양검사 ◑ 검체를 직접 배양에 이용하여 미생물이 자라는 것을 확인함으로서 균을 동정하는 방법이다. ◑ 시료에서 미생물을 분리 배양할 때는 호기 배양 법, 혐기배양법, 이산화탄소배양법을 이용한다.

병원성 미생물의 분자생물학적 진단 제한절편길이다형성법(restriction fragment length polymorphism;RPLP)법→DNA 절편들의 차이를 통해 미생물을 동정함 핵산부합법→DNA 탐침자를 이용하여 시료 내의 특정 염기 서열을 갖는 핵산을 검출 중합효소연쇄반응법→시료 내 미생물의 특정 핵산 부위를 증폭시켜 그 존재 유무 및 종류 확인 웨스턴 블롯(Western blot)→병원체의 존재 유무 및 종류를 동정하는 데 이용

혈청학적 진단 특이적인 항원-항체반응을 이용하여 병원체에 대 한 정보를 얻을 수 있을 뿐만 아니라 환자의 혈액 속에 존재하는 특정 병원체에 대한 특이적 항체를 측정함으로써 미생물 감염을 진단할 수 있는 면역 학적 기법이 혈청학적 진단법이다. 시료 내에 존재하는 병원체 유래의 항원을 검출하 고 그 양을 정량화할 수도 있는 장점

감염 감염이란 → 병원성 미생물이 숙주에 침입하여 정 착하는 현상을 말한다. 감염질환→ 임상증상을 나타내는 경우에만 감염질 환이라 한다. 집락화→ 증상을 유발하지 않은 채 신체 일부에 지속적으로 존재할 경우(예 : 정상균무리) 무증상 감염→ 숙주의 방어능이 제대로 작동하고 병원성 미생물의 감염에도 불구하고 증상이 나타 나지 않는 경우 병독력(병원성)→ 미생물이 감염을 일으킬 수 있는 능력을 말한다.

감염의 병인기전 현성감염→ 병원성 미생물의 숙주 내 침입, 정착, 그리고 집 락화 후 어떻게 진행되느냐에 따라 질병의 증상을 나타내 는 증상/불현성감염 잠복감염→ 지속적으로 불현성 감염 상태를 유지 기회감염→ 숙주의 정상균무리로 존재하는 병원성이 없거 나 아주 낮은 미생물이 숙주의 방어능력이 손상받았을 때 감염질환을 일어나는 것 만성감염→ 세포 내 기생세균이 세포질 내에서 사멸되지 않고 증식하면서 질병을 일으키는 감염

감염의 병인기전 병원성→ 질병을 유발할 수 있는 능력 말하며 독력→ 집락화 및 침입능과 독소 생성능으로 구분 할 수 있다. 침입능은 숙주의 세포 또는 조직에 침 입하여 집락을 형성하고 조직손상을 초래할 수 있 는 능력을 말한다. 독소 생성능은 숙주조직을 손상 시켜 질병을 일으키는 독소를 생산할 수 있는 능 력을 말한다.

세균감염에 의한 발병기전 1)부착인자 2)세포 및 조직 침투능 3)독소 생산능 외독소 내독소(그람음성균의 지질다당체.LPS) 4)효소 (1)조직분해효소 (2)IgA1 단백 분해효소 5)항식균인자 6)세포내 생존능 7)항원 다양성 8)철분 요구

부착인자 세균이 인체 내로 들어오면 조직 표면에 있는 세포 에 부착되어야 한다. 섬모 숙주세포에 대한 부착소이다. 섬모 숙주세포에 대한 부착소이다. 일부 세균은 세균의 다당체 기질에 의하여 서로 뭉 쳐진 균막을 형성하여 표면에 부착할 수 있다.

세포 및 조직 침투능 질병을 유발하는 여러 세균에서 상피세포를 침투 하는 능력은 주요 병원성 인자로 작용한다. 침투능은 숙주세포로 세균이 들어가는 것을 말한 다

독소 생산능 미생물에서 생성되는 물질로서 동물에 가해지면 장애를 일으키는 물질을 독소라 하며 독소는 외독소와 내독소 로 나눈다 외독소→ 세균이 증식할 때 균체 밖으로 방출되는 균체 외 독소를 말한다. 외독소는 그람양성이나 음성을 막 론하고 외독소 생성한다. 외독소의 독성은 없으나 항 원성은 있는 상태로서 백신으로 사용된다. 내독소(그람음성균의 지질다당체, LPS)→LPS는 그람음 성균의 외막 성분으로 세균이 사멸될 때 균체 밖으로 유리된다. 내열성이며, 발열, 백혈구 감소증, 저혈당, 저혈압을 유발하고 필수장기에 혈액공급에 장애가 생 겨 쇼크를 일으킬 수 있으며 또한 혈관 내 응고와 다 수장기의 기능이상에 의해 치명적 결과를 초래 할 수 있다

효소 조직 분해효소→ 많은 용혈성 연쇄상구균은 혈장 내 단백 분해효소를 활성화시키는 스트렙토키나 아제(섬유소 용해소)를 생산한다. 일부 세균은 적 혈구를 용해하거나 (용혈소), 조직세포 혹은 백혈 구를 용해하는 세포 독소라는 물질을 생산하기도 한다. IgA1 단백 분해효소→ IgA1 단백 분해효소는 병원 균이 점막 표면에서 분비되는 항체를 불활화시켜 항체에 의한 숙주의 방어를 회피하는 기능을 한다.

항식균인자 일부 병원균은 숙주의 구성성분을 세균 표면에 흡 착시켜 식균작용 및 백혈구의 살균작용을 회피한 다

세포 내 생존능 포식-리소좀으로의 진입을 회피하여 세포질 내에 서 증식하거나 포식-리소좀 융합을 억제하여 식포 내에서 생존하며 증식하거나 또는 리소좀 효소에 죽지 않음으로써 포식-리소좀 안에서 생존할 수도 있다.

항원 다양성 세균의 표면구조는 많은 성분이 항원 다양성을 갖 고 있다. 세균이 지닌 항원성은 맹독인자는 아니나 병원균의 일정 혈청형은 맹독성의 표식이 될 수 있 다 일부 세균은 항원형이 변이를 일으키는 경우가 있 다. 혈청형 변이는 유전적으로 결정되며 이러한 변 이는 숙주의 면역체계를 회피할 수 있게 해주어 면 역체계에 의해 공격하지 않는 세균이 살아남아 질 병을 일으킬 수 있게 한다

철분 요구 다른 세포처럼 세균은 증식하기 위해0.4~4㎛ol/L 의 철분이 필요하다 철분의 획득할 수 있느냐 여부는 병원균의 맹독성 에 영향을 끼친다.

바이러스의 발병기전 1)바이러스-세포 간의 효율적인 접촉 2)바이러스에 의한 세포 손상기전 (1)바이러스에 의한 직접손상 (2) 바이러스에 의한 간접 손상 3)바이러스 감염

바이러스-세포 간의 효율적인 접촉 숙주세포의 표면에 존재하는 특이 수용체에 바이러스 가 부착되어야 한다. 감수성이 있는 세포막 표면에 바이러스가 부착하는 방 식으로 호흡기도, 결막, 장관의 점막 상피세포 위에 부 착함으로써 감염이 시작된다. 피부, 점막에 생긴 상처를 통해 바이러스가 체내에 침 입하기도 하고 모기 및 진드기 등 흡혈곤충에 물린 바 이러스가 숙주의 체내로 직접 주입되는 경우

바이러스에 의한 세포 손상기전 바이러스에 의한 직접 손상→ 숙주의 단백합성을 억제하거나 세포에 독성을 나타내는 인자를 생성 하거나 세포막 성분(세포질 내의 리소좀이나 내포 의 막 또는 세포외막의 변화를 유발하여 세포에 해로운 결과를 초래한다. 바이러스에 의한 간접 손상→바이러스 유전자에 의해 생성된 단백은 강력한 항원으로 작용하여 특 이 면역반응을 유발한다. 이러한 바이러스 특이 면역반응은 세포 외부에 존재하는 바이러스나 세 포막에 존재하는 바이러스 모두에 특이하게 반응 한다.

바이러스 감염 인체 내로 바이러스가 침입해 들어오고 그 침입 부 위의 세포 내에서 바이러스가 증식된 상태를 감염 의 성립으로 간주한다 현성감염 불현성감염 만성 감염 잠재감염 재발감염-단순포진바이러스, 수두-대상포진바이 러스나 거대세포바이러스 지발감염-스크래피, 쿠푸, 아급성 경화성 범뇌염

감염원과 전파경로 1 감염원 1)무생물→흙에 있는 소수의 클로스트리디움속 균이 파상풍, 가스괴저 및 보툴리즘. 조리대 및 욕조에 흔히 분포하는 녹농균은 인체감염이 가 능한데 , 물 속에서도 잘 증식하고 수술실에서 멸균수의 보급을 위해 사 용하는 용기의 수분 내에도 있을 수 있고 , 호흡보조기의 수분에서도 증 식할 수 있다 2)동물→소, 돼지, 닭, 오리 등 모든 동물에서 병원성을 나타낸다. 쥐는 페스트군, 발진티푸스군, 렙토스피라군 원숭이는 황열, 댕기열 및 폴리오 바이러스, 개는 광경병 바이러스 3)사람→ (1)급성 감염 환자→환자의 코, 인후, 폐, 장관 상처에서 나오는 점액, 객담, 대변, 고름 (2)만성 감염 환자→폐결핵 (3)접촉 보균자→의사, 간호사 또는 환자 가족 (4)비접촉 보균자→접촉 보균자로부터 자기도 모르게 정상인 에게도 옮겨가서 이들을 비접촉 보균자로 만듬

감염원에서 침입문호까지의 병원체 전달양식 1)호흡기 전달 2) 대변에서 구강으로의 전달 3)외상성 창상에 의한 전달 4)성 접촉에 의한 전달 5)곤충에 의한 전달 6)수직전달과 수평전달 7)교차감염

침입문호 1)흡입 2)섭취 3)피하주입 4)도찰 5)주입

침입문호에서 병변부위까지의 인체 내 전파 1)림프액과 혈액 내로의 전파 2)혈액에서의 전파 3)신경세포를 통한 전파 4)뇌척수를 통한 전파 5)기타

감염의 병리기전 과민반응 제 1 형 알레르기 반응 과민반응 제 2 형 세포독성 반응 과민반응 제 3 형 면역복합제 질환 과민반응 제 1 형 알레르기 반응 과민반응 제 2 형 세포독성 반응 과민반응 제 3 형 면역복합제 질환 과민반응 제 4 형 지연성 면역반응