Plant Molecular Physiology Lab.

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1 Plant Molecular Physiology Lab.
11. PHOTOSYNTHESIS SUBJECT 11. PHOTOSYNTHESIS Plant Molecular Physiology Lab.

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11. PHOTOSYNTHESIS PURPOSE 식물의 기공을 현미경으로 관찰하여 기공과 공변세포의 구조와 기능, 개폐 기작을 알아본다. Chromatography의 원리를 이해하고 시금치로 부터 광합성 색소를 분리한다. PROCEDURE 기공관찰(공변세포 내 K+ 축적과 기공 개폐) Materials ∙ 가루얼음 ∙ 램프 스탠드 ∙ 현미경 ∙ Slide glass ∙ 면도날 ∙ 핀셋 ∙ 알루미늄 호일 ∙ Cover glass ∙ Petri dish (직경 약 9 ㎝) ∙ Petri dish (직경 약 5 ㎝) ∙ 50~100 ㎖ 용량 beaker ∙ 2M KOH Plant Molecular Physiology Lab.

3 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실
11. PHOTOSYNTHESIS Methods 1. 암에서의 반응 1) 직경 9㎝의 큰 Petri dish에 D.W를 붓고 잎의 절편 (2~3 ㎝길이) 2~3개를 띄우되 잎의 윗면이 D.W에 닿도록 엎어 놓는다. 2) 잎 절편 위에 CO2 가스나 입김을 여러 차례 불어 넣은 후 덮개를 덮고 알루미늄 호일로 싸서 암실에 둔다. 2. 명에서의 반응 1) 큰 Petri dish에 DW를 붓고 그 중앙에 약간의 2M KOH가 담긴 작은 Petri dish를 놓는다. 2) 잎 절편 2~3개를 위에서와 같이 엎어 D.W에 띄운다. 이때 KOH 용액이 D.W에 넘치지 않도록 주의한다. 3) 열 차단 필터를 통하여 램프 스탠드의 빛으로 30분 동안 반응시킨다. 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실

4 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실
11. PHOTOSYNTHESIS 주의점: 조작 중에는 입김이 표피층에 닿지 않도록 주의한다. 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실

5 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실
◎ 광 선 ◎ 암 소 11. PHOTOSYNTHESIS Results 암에서의 반응 명에서의 반응 10x40 10x40 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실

6 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실
11. PHOTOSYNTHESIS 고 찰 ① 공변세포 내 K+ 분포와 기공 개폐와의 상관관계는? ② 공변세포와 곁세포(부세포)의 관계는? (물질교류 측면) ③ K+ 이외에 기공의 개폐에 영향을 미치는 요인은 어떤 것이 있는가? 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실

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11. PHOTOSYNTHESIS PROCEDURE 2. 크로마토그래피 1) 엽록소 추출 잎맥을 제거한 시금치 1~2g과 80% 아세톤 5ml을 막자사발에 넣고 막자로 갈다가 아세톤 5ml을 더 넣고 용매가 2~3ml만 남을 때까지 계속하여 완전히 간다. Plant Molecular Physiology Lab.

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11. PHOTOSYNTHESIS 2) 크로마토그래피 여과지를 test tube 에 적당한 크기(1.5cm*14cm)로 자른다. 여과지의 끝에서 2cm거리에 연필로 가는 선을 긋는다. 시금치 추출액을 파이펫 팁에 찍어 여과지 연필로 그어둔 선의 중앙에 한 방울씩 찍고 말려가면서 20~30회 반복한다. 여과지를 고정 시킨 후, 전개용매(석유에테르: 아세톤=9:1)가 들어있는 test tube에 넣는다. 이때 여과지가 시험관 벽면과 바닥에 닿지 않도록 주의해야 하며 전개용매에는 약 0.5cm정도만 잠기도록 한다. 전개액이 여과지 위쪽 0.5cm정도 못 미치는 곳까지 전개되었을 때 여과지를 꺼내어 재빨리 전개액이 전개된 부분을 연필로 표시한 후 여과지가 완전히 마를 때까지 기다린다. Plant Molecular Physiology Lab.

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11. PHOTOSYNTHESIS 실험결과 정리 2. 크로마토그래피 색소대의 위치를 연필로 표시하고 건조시킨 후 크로마토그램을 실험보고서에 붙인다. 각 물질을 동정하고 각 색소의 전개율(Rf : Ratio of Flow )을 구한다. Rf = D1/ D2 D1 = 각 용질이 이동한 거리 D2 = 용매가 이동한 거리 ( 용매 시작선과 용매 끝 선의 거리) Rf (1)= a/ d Rf (2)= b/ d Rf (3)= c/ d 색소명 엽록소 b 엽록소 a 크산토필 카로틴 색깔 전개율(Rf ) 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실

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Plant Cell Culture 다음 실험 예비 레포트 PLANT CELL CULTURE 식물이 자라는데 필요한 최적 조건 MS배지에 필요한 미량 원소 조사 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실