Clostridium difficile 정량 배양과 반정량 배양의 비교 진단검사의학과 미생물계 박상준
Clostridium 대부분 편성 혐기성 세균 일부 균종은 내기성 형태 : 막대모양, 곧거나 약간 굽음 그람양성 간균 항균제 유발 설사 위막성 대장염 토양, 물, 동물의 장내 독소 생성 : A 독소 (enterotoxin), B 독소 (cytotoxin) C. difficile
Cytotoxin gene No. (%) of specimens with C. difficile (CFU/mL) Total < < < <10 6 10 6 Positive4 (1.0)9 (2.2)30 (7.5)58 (14.4)301 (74.9)402 (100) Negative2 (2.1)6 (6.5)16 (17.2)22 (23.7)47 (50.5)93 (100) Total6 (1.2)15 (3.0)46 (9.3)80 (16.2)348 (70.3)495 (100) C. difficile 감염 진단을 위한 정량배양 평가
실험 목적 정량법 시험 workload 감소 필요 반정량법 결과, 독소생성 시험 : – 결과의 해석에 어려움이 없을 것으로 예상 검사원가 절감
검체 채취와 수송 신선한 설사변 ml 고형변 - 의미없음 4 ℃에 2 일간 보관 가능
배 양 Modified CCFA (cycloserine cefoxitin egg yolk fructose agar) : Amphotericin 첨가 시간 37 ℃ 배양 후 관찰 집락 : 담황색, 원형이거나 불규칙, 편평 가장자리는 나무뿌리 모양 표면은 굵은 유리 p - cresol 냄새
정량 배양 CCFA-A 에 1/10, 1/1,000, 1/10,000 로 희석 배양 희석시 anaerobic thioglycollate 배지 이용 Colony 수를 센 후 희석배수를 곱하여 변 1g 당 세균수 계산 반정량 배양 기간 : (20 일간 ) CCFA-A 에 변을 직접 접종 배양 Colony: 1, 2, 3 차 획선 증식 - few, some, many
시험관 번호 1234 변 또는 희석액의 양 0.1 ml0.4 ml ↓↓↓↓ Thioglycollate 배지 ↓4 ml 희석배수 ↓ (1/100)(1/1,000) ↓ ↓↓ CCFA 배지에 접종 0.1 ml 최종희석 배수 1/10 1/1,0001/10,000 정량배양 방법
비교결과 배양방법 No. samples 정량 반정량 (40 검체 ) NG NG ,000 some 1 280,000 some 1 >1,000,000 many 7
요약 (1) 기존 CCFA 862 X 3 = 원 Anaerobic thio = 원 Syringe: 원 Gas: 원 Sheet: 원 Total 원 반정량법 CCFA: 원 Gas: 원 Sheet: 원 Total: 원 건당 원 절감 총 건수 건 / 연 (2002 년 기준 ) 연 원 절감
요약 (2) Workload 감소 – 기존 : 약 분, 반정량법 : 1 – 2 분 단점 집락 순수분리 어려움 : 세심한 관찰 필요 - 순수 분리가 잘 안될 경우 blood agar 추가사 용 예상됨
결론 정량 배양법과 반정량 배양법 : 비례 업무 단순화를 통한 시간 절약 원가 절감 -> 항균제 유발설사 진단시 유용