Dept. of Laboratory Medicine Hee Joo Lee 2006, 5, 25 진단면역학 Dept. of Laboratory Medicine Hee Joo Lee 2006, 5, 25
Chapter 32 면역측정법 및 면역화학적 측정법 Chapter 37 HLA와 장기이식 Chapter 39 면역결핍질환 Chapter 40 류마치스 질환의 면역학적 검사 Chapter 43 알레르기 질환 Chapter 45 감염질환의 혈청학적 진단
학습목표 면역측정법의 원리를 이해한다. HLA검사법을 이해한다. HIV질환의 진단을 이해한다. FANA와 ANCA 검사를 이해한다. 알레르기 검사를 이해한다. 감염성 질환의 혈청학적 표지자를 이해하고 바이러스성 질환의 진단을 위한 검사를 안다.
Immunoassay의 종류 Precipitation(침강법) Agglutination(응집법) EIA (효소면역측정법) Manual: Double immunodiffusion Automation: Turbidimetry, nephelometry Agglutination(응집법) Manual: Latex agglutination, hemagglutination EIA (효소면역측정법) colorimetric EIA fluorescent EIA chemiluminescent EIA FIA (fluorescent immunoassay, 형광면역측정법) CLIA (chemiluminescent immunoassay, 화학발광면역측정법)
침강 1) 원리: 용해성의 항원과 항체의 결합 2) 영향을 미치는 인자: 항원과 항체의 상대적 농도 제일 중요 3) 이용분야 4) 측정법 : Immunodiffusion : single ID, double ID, electro ID, IEP Turbidimetry : 항원 항체 복합체에 의해 차단되는 빛의 양으로 측정 물질을 계측 Nephelometry : 빛이 산란되는 정도로 측정 물질 계측
Precipitation - Double immunodiffusion
Immunoelectrophoresis : EP+ Immunodiffusion
Immunofixation electrophoresis
agglutination Principle Latex agglutination Particulated antigen + antibody → agglutinate Latex agglutination Qualitative or Quantitative More sensitive than precipitin assay Coombs’ test, ABO시험, Widal 검사 Agglutination The antibody-mediated clumping of particles that express antigen on their surface. Precipitation The formation of an insoluble, usually visible, complex when soluble antibody reacts with soluble antigen.
Fluorescence immunoassay Fluorochrome Ground state에서 energy(예: blue light)를 받고 나서 exited state가 되었다가 다시 ground state로 떨어지면서 낮은 에너지의 빛(예: green light)을 냄 Excited state에서는 unstable하기 때문에 다시 원래의 상태로 돌아가고자 하는 것인데 일부는 열로 발산이 일어나기 때문에 ground state로 다시 떨어질 때 내는 빛은 absorbed light보다 낮은 에너지의 빛을 발산하게 됨 원리 : fluorescent isothionate(FITC), 형광물질 표지
Direct IF Indirect IF
Fluorescent anti-nuclear Ab test
효소면역측정법 1) 원리 : 항원 항체 반응 유무와 정도를 효소 표지자를 이용하여 측정하는 방법 2) 종류 3) 이용분야 Homogeneous EIA : enzyme multiplied immunoassay technique(EMIT) Heterogeneous EIA ELISA 3) 이용분야
Competitive Enzyme immuno assay
Non competitive EIA
방사면역측정법 (Radioimmunoassay, RIA) 화학발광면역측정법 (Chemiluminescent immunoassay)