Western blot.

Slides:



Advertisements
Similar presentations
Western Blot Analysis using His-Tag Antibody 조교 : 최 혜 정 (s338)
Advertisements

Western blot. 1. Western blot Western blot 과 면역염색법 (Immunostaining) 은 여러 단백질의 혼합물로부터 찾고자 하는 단백질 에 대한 항체를 사용하여 항원 - 항체 반응을 일으킴 으로써 특정단백질을 찾아내는.
생화학 실험 (2) 5주차 Subcloning Ⅱ : Detection of Subcloning - Rapid Microscale Isolation of Plasmid from Transformed Cells 담당교수 : 하상준 교수님 담당조교 : 조소영.
Mini-prep, Restriction Enzyme 분자생물학실험 SUBJECT. Sequence blast Restriction enzyme Mini-prep E.coli transformation TA Ligation PCR DNA EXTRACTION 분자생물학실험.
담당 교수님 : 김건수 교수님 담당 조교님 : 김익중 조교님 생명과학과 안혁근 서강대학교 Sogang university DNA microarray 를 이용 한 유전자 differential expression 정량측정 실험.
Preparation and concentration determination of plasmid DNA from E.coli
RNA isolation from monolayer cell
식품의약품안전청 _KJYDGP DNA Methylation by EZ DNA Methylateion-Gold Kit (ZYMO RESEARCH) 1-2. The Sample list 1-1. The Method of Methylation.
PCR mediated mutagenesis 2013 년도 2 학기 생화학 실험 (2) 6 주차 조교 : 전지선.
1 Clinical Biochemistry Lab. College of Health Science, Department of Biomedical Laboratory Science SDS-PAGE gel making Clinical chemistry experiment.
Western Blot Analysis using His-Tag Antibody
Gal4-UAS System in Drosophila melanogaster
2017 법인관련 개정세법 곽장미 세무사.
Western Blot Analysis using His-Tag Antibody
1) 미생물의 배양법 미생물이란 LB배지 미생물 배양 방법 고체배양 : 사면배양/ 천자배양 …
분자 생물학 5장. 핵산 취급 기술.
고분자 공학 설계 과제 2011년 1학기 Polymer Materials Laboratory
신입생 예비대학 안내 2007학년도 2. 장 소 : 에버랜드(행사기간 자유이용권 지급) 4. 세부행사 일정
1 2 3 목 차 『안전의식 강화』 교육 취지 및 당부사항 (30’)
Western blot.
Western blot.
통상 뇨 검사 중 RBC와 WBC의 Strip 검사 결과와 현미경 검사 결과 비교 평가
RNA analysis.
Chromatographic Separation of Protein
PCR mediated mutagenesis 생화학 실험 II
∘ 체세포분열과 생식세포분열의 특징을 비교하시오.
분자생물학실험 SUBJECT Electrophoresis 결과 확인, Sequence blast
PCR (Polymerase Chain Reaction) Ⅰ
Technical Tips & Cautions
분자생물학 실험 Western blot analysis.
분자생물학실험 Total RNA extraction RNA quantitation CDNA synthesis RT-PCR
분자생물학실험 Introduction.
Mammalian cell culture Ⅲ (Real-time PCR)
Spectrophotometer & Determination of Protein concentration
4.Mendelian segregation
TransformationⅠ.
Western blot.
유전자 발현 분석 (Analysis of Gene Expression )
Western Blot.
분자생물학실험 SUBJECT DNA extraction.
Western blot.
Chapter 7-2.
Western blot.
2018-2학기 생명과학실험기법 Reverse transcription PCR & Real-Time PCR.
HLA 교차시험 ( HLA crossmatch)
단백질의 정량 -Bradford 법
/nwtoday/article/ _19847.html
Mammalian cell culture Ⅰ
PCR (Polymerase Chain Reaction) Ⅱ
세포생물학 및 실험 학기 생명과학과 박태식 교수님 화요일 (1-4 교시) Real time PCR (Q-PCR)
가천대학교 생명과학과 생물학 및 실험 학기 생물학 및 실험 1 Exp 6. 확산과 삼투.
Macromolecule analysis Ⅱ-② TLC(thin-layer chromatography)
Restriction enzyme Ⅰ.
염색체 관찰 및 체세포분열 (식물 근단 분열조직 관찰)
단백질의 정량 -Bradford 법
REPORT 교 과 목 : 산업 및 안전공학 담당교수 : 곽효연 교수님 학 과 : 산업시스템 경영 학 번 :
Western blot 생명과학 실험기법 (13주차).
Western blot 생명과학 실험기법 (12주차).
2010년 연말정산 교육자료 센터운영팀 인사파트
Ⅳ. 생식과 발생 4. 자손에게 줄 세포 만들기.
“병원 폐기물 소각장” 및 “가축 폐수 처리장” 건축 허가 반대 (2011년 “음식물처리장” 미해결 민원 연관)
LC-MS 단백질 분석을 위한 SDS-PAGE staining protocol 및 주의할 점
단백질의 정량 -Bradford 법
세계영화사 입문 3강 소련영화의 혁명 소비에트 몽타주.
Western blot.
제6장 효소의 생산, 추출 및 정제.
Restriction enzyme Ⅱ.
Immunofluorescence Staining
1. 칭찬 및 고발제도 운영(안) 1. 목적 : 칭찬문화의 전사적 확산,전파를 통한 칭찬문화 조성 및 건전한 회사문화 형성
사회복지협의회와 지역사회복지협의체.
Presentation transcript:

Western blot

지난 주 실험 개요 Western blot Cell harvest Gel electrophoresis (SDS PAGE) Cell lysis 단백질 정량 (Sampling) Gel electrophoresis (SDS PAGE) Transfer Blocking

실험 개요 Primary, secondary antibody incubation Developing (using film)

Introduction Membrane으로 transfer한 단백질을 Film 또는 chemi-doc를 통해 단백질의 양을 상대적으로 측정하는 과정

Introduction

Introduction Primary antibody Secondary antibody

Materials & Methods Primary incubation TBS-T wash 5min, 3 times A B Secondary antibody incubation for 1hour 30mins ECL A, B 를 각각 200ul를 E-tube에 섞는다. 랩에 membrane을 올려 놓고 ECL을 뿌려 놓는다. Chemi-doc으로 측정 A B Shaking incubator

Result ① ② ??kDa → →CPT1 ??kDa → →β-actin marker control WY 1.083 dosage 실험 결과 SDS-PAGE OD (y값) ug/ul (x값) X = (y-0.0732)/0.0583 로딩량 (uL) /30ug 30/x값 5X loding dye DW (or RIPA) 총볼륨 =20uL A 1.083 17.32075 1.7 4 14.3 20 B 0.689 10.56261 2.8 13.2 ② marker control WY ??kDa → →CPT1 Bradford 용액 ??kDa → →β-actin

Discussion Q. Lowry method, Bradford method에 대해 알아보세요 실험결과 해석 및 고찰

Report 12+13+14 12/7 5시 까지 제출