Catalase 음성 그람양성구균의 동정 원주의대 어 영

서 론 다양한 균속이 속해 있다. 균속과 균종명의 분류 변화가 심하다. 분리빈도가 증가 추세에 있다. 항균제 감수성 양상이 다르다. 감별 동정이 어렵다.

종 류 Streptococcus Abiotrophia (NVS) Enterococcus Globicatella Lactococcus Aerococcus Gemella Helcococcus Pediococcus Leuconostoc

동정 방법 전통적 방법 상품화된 제품 분자유전학적 방법

전통적인 방법 그람염색 기본적이면서도 가장 중요하다.

균속의 동정

그람염색의 주의 사항 배지에 따라 염색양상이 다르다. Leuconostoc, Streptococcus, etc 한천평판배지 → 구간균, 연쇄띠가 짧다 액체증식배지 → 구균, 연쇄띠가 길다 Gemella 탈색이 잘된다 → 그람음성구균 Aerococcus 액체증식배지 → 사련형 관찰이 잘된다

S. pyogenes 혈액한천배지 그람염색

S. pyogenes 액체배지 그람염색

Catalase 시험 주의 사항 Staphylococcus, Stomatococcus 드물게 음성 반응 Enterococcus, Aerococcus, Streptococcus 드물게 양성 반응

Catalase 시험 검사시 오차 원인 위양성 위음성 집락과 과산화수소를 섞을 때 Hydrogen peroxide를 떨군 다음 집락을 묻힐 때 혈액성분이 묻혀진 집락으로 시험할 때 실온에 장기간 보관할 때 위음성 24시간이 지난 집락으로 시험할 때 빛에 장기간 노출된 hydrogen peroxide의 사용

Catalase 음성 GPC의 선별시험 고려할 사항 분리빈도가 높은 균속 병원성이 높은 균속을 대상으로 신속하고 정확하며 가격이 저렴한 방법

연쇄구균과 장구균의 선별시험 용혈성, 그람염색만으로는 구분할 수 없다. 6.5% NaCl 내성시험 Bile esculin 분해시험 PYR 시험 → NaCl-esculin 가수분해시험 → PYR 시험 4시간내에 판독

NaCl-esculin과 PYR 선별시험

NaCl-esculin과 PYR 선별시험

NaCl-esculin과 PYR 선별시험

선별시험후의 동정과정 NaCl-esculin 가수분해 +, PYR 시험 + Enterococcus Lactococcus Vagococcus Globicatella Aerococcus → Microplate 법으로 균종 동정

장구균 동정시 생화학 시험 결과 판독시 주의 사항과 문제점 E. cecorum, E. columbae, E. saccharolyticus → PYR negative 운동성 음성 E. casseliflavus, E. gallinarum → E. mundtii와 E. faecium으로 동정 가능성 E. faecium은 생화학 표현형이 다양하다. → Raffinose 양성 → E. casseliflavus로 동정 배지에 따라 균종별 생화학 성상이 다르다.

장구균 동정시 생화학 시험 결과 판독시 주의 사항과 문제점 Tellurite 내성 시험 → E. casseliflavus에서 양성균주가 있고 E. faecalis에 음성인 균주가 있다. 운동성 시험은 배양기간이 오래 걸린다. Efrotomycin (Kirromycin)은 고가이다.

장구균 동정을 위한 생화학 시험 당분해 시험 Mannitol, sorbitol, arabinose, raffinose, sucrose, methyl-a-D glucopyranoside, ribose Arginine dihydrolase Pigment 생성시험, 용혈성 시험

MAN SBL ADH ARA RAF SUC MGP RIB

NaCl-esculin -, PYR 시험 + S. pyogenes, Helcococcus, Alloiococcus, Gemella, Globicatella b-hemolytic strain→ S. pyogenes로 동정 non-b-hemolytic strain → 무균체액에서 분리되면 완전동정 → 그이외의 검체에서 분리되면 서술적 동정

NaCl-esculin +, PYR 시험 - Streptococcus, Aerococcus, Pediococcus, Leuconostoc, Lactococcus, Tetragenococcus b-hemolytic strain → 혈청군 시험 non-b-hemolytic strain → 무균체액에서 분리되면 완전동정, 그이외의 검체에서 분리되면 서술적 동정

NaCl-esculin -, PYR 시험 - Streptococcus, Leuconostoc, Pediococcus, Aerococcus b-hemolytic strain → 혈청군 시험 non-b-hemolytic strain → Spot CAMP test : 양성이면 S. agalactiae로 동정 : 음성이면 무균 체액에서 분리된 균종은 완전동정하고, 그 외의 검체는 서술적 동정한다.

Vancomycin 내성 catalase 음성 그람양성구균 VRE, Pediococcus, Leuconostoc MRS broth Leuconostoc : Gas production in MRS broth