Macromolecule analysis Ⅱ-② TLC(thin-layer chromatography)
실험 목적 혼합물의 분리 및 확인 이해 시료와 용매의 분배차를 이용한 크로마토그래피(chromatography) 원리 이해 TLC로 화합물 분리하기 혼합물의 분리 및 확인 이해 시료와 용매의 분배차를 이용한 크로마토그래피(chromatography) 원리 이해
Introduction 크로마토그래피에는 기체나 액체 크로마토그래피와 같이 관을 이용하는 것과 얇은 막이나 종이를 이용하는 박층크로마토그래피(TLC)가 있다. TLC의 정지상은 평면 유리, 플라스틱, 금속판 위에 지지되어 있는 얇은 물질층이다. 이동상으로 사용되는 용매는 모세관 작용 혹은 중력이나 전기적 전위의 도움을 받아 정지상을 통하여 이동한다. 혼합물의 정지상이나 이동상에 대한 친화성이 서로 다른 점을 이용하여 분리된다.
Introduction Rf값 : 정해진 조건에서 같은 물질의 Rf값은 일정하다. 물질 동정에 있어 중요한 계수로 작용한다. TLC
Materials & Methods 후드,TLC판, TLC전개통,건조기, 유리판 덮개, 전개용매, 추출액,표준물질 ▶ Sample preparation (후드안에서) 전개통을 준비하고 전개용액을 부어둔다. 지질 추출액과 대조물질들을 TLC 판에 점적한다. 드라이기로 점적한 용액을 충분히 말려준다. TLC판을 전개통에 넣고 전개용액이 충분히 전개되도록 한다. (약 1시간) 다른 전개통에 아이오딘을 넣고 발색시킨다. 추출한 지질이 나타낸 반점들의 Rf값을 측정한다.
Results TLC 전개 판 사진 Rf값 구하기
Discussion Q. 지질을 분석할 수 있는 다양한 방법 중 하나 이상에 대하여 서술하시오