전혈에서 시간과 온도에 따른 ACTH 의 안정성 평가

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1 전혈에서 시간과 온도에 따른 ACTH 의 안정성 평가
신선영, 이현주, 민경선, 우재룡, 이호영 서울특별시립 서울대학교 보라매병원

2 연구 배경 ACTH검사에서 신속한 혈장분리과정은 검사결과의 신뢰성에 영향을 줄 수 있음.
Adreno Corticotropic Hormone (ACTH) 단백질 분해에 의해 매우 불안정한 호르몬. 짧은 반감기. 단백질 분해효소의 활동을 막기 위해 4℃온도 유지.

3 ACTH 전처리 과정 냉각 EDTA 채혈 얼음을 넣은 컵 수송의 문제 검사실 수송 냉장원심분리 -20℃보관

4 이전 연구 (Martin et al, 2006) 전혈 상태의 ACTH의 안정성은 온도보다 원심분리 될 때 까지의 시간에 의존.
(Jane et al, 2003) 전혈 상태에서 ACTH, AVP, VIP 호르몬의 안정성. (유선희 et al, 2007) 혈장에서 ACTH의 안정성.

5 연구 목적 실온 EDTA tube 사용이 ACTH결과에 미치는 영향. 혈장분리 전 시간과 온도가 ACTH결과에 미치는 영향.
불안정성을 조사하고, 가치 있는 정보를 제공.

6 대상 및 방법

7 Blood Samples 전체 22명의 검체를 대상. 냉각된 EDTA tube와 실온 EDTA tube에 각각 채혈.
즉시 원심 분리하여, 측정될 때 까지 -20℃보관. 전혈 상태의 EDTA 검체를 조금씩 나누어 분주. 실온에서 2시간, 4시간, 24시간, 냉장에서 24시간 방치. 원심 분리하여, 측정될 때 까지 -20℃보관.

8 ACTH 실험 면역방사계수측정법 (IRMA) CIS Biointernational (Gif-sur-Yvette, France)
측정간정밀도 CV < 5.3% 측정내정밀도 CV < 6.1%

9 통계 처리 SPSS 15.0 Wilcoxon Signed Ranks Test : 시간과 온도에 따른 결과 분석.
P-value : <0.05 Sigmaplot 7.0 Box Plot : 냉각 EDTA vs. 실온 EDTA 냉장24시간 vs. 실온24시간 Line and Scatter Plot ( Simple Error Bars) : 시간과 온도에 따른 변화 커브 그림.

10 Results

11 ACTH 측정결과 전처리 상태 검체수 ACTH 농도 (pg/ml) ACTH 감소율 (%) P-value 냉각 EDTA 즉시
22 35-128 실온 EDTA 즉시 16 ND-111 26.3 0.038 실온 2시간 방치 11 ND-99 47.2 0.015 실온 4시간 방치 ND-96 39.1 0.009 실온 24시간 방치 7 ND-75 34.2 0.018 냉장 24시간 방치 ND-78 51.6 0.043

12 냉각 EDTA vs. 실온 EDTA (P=0.038) 냉각 실온

13 실온에서 시간에 따른 변화 (P=0.038) (P=0.465) (P=0.786) (P=0.225)

14 4℃에서 시간에 따른 변화 (P=0.043)

15 냉장24hr vs. 실온24hr (P=0.066) 냉장 실온

16 요 약 I 실온 EDTA tube를 사용하였을 때, 유의하게 결과가 낮아짐을 확인.
실온에 방치된 시간에 따라 ACTH결과가 유의하게 4℃에 보관해도 24시간 후에는 유의하게 낮아짐.

17 요 약 II 냉장과 실온 24시간방치 결과가 유의하지 않음. 전혈상태로 실온에서 2시간 방치되면, 47.2% 감소됨.
전혈상태로 24시간까지 방치 될 경우, 최대 51.6% 감소됨.

18 결 론 냉각된 EDTA tube사용이 필수적, 채혈 된 검체 는 수송되기 전까지 4℃에 보관.
신뢰성 있는 검사결과를 위해서는 가능한 한 신속한 검체 전처리 과정이 필요. 전혈로 4℃에 보관하였을 때, 시간에 따른 안정성에 대한 후속 연구 필요.

19 감 사 합 니 다.