항결핵약제 신속내성검사의 소개 2011. 5. 12 미생물파트 강선영.

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1 항결핵약제 신속내성검사의 소개 미생물파트 강선영

2 목차 배경 서론 방법 결과 요약

3 배경 다약제내성결핵 (Multi-Drug Resistant Tuberculosis) 다약제내성 결핵 유병율
- 일차 항결핵약제인 리팜핀 (Rifampicin),아이나 (Isoniazid) 내성결핵균 - 4~5개 이상의 약제병합, 장기간의 치료에도 치료 성공률 낮음 - 50 %의 사망률을 보이는 치명적인 질환 - 최근 광범위내성결핵과 더불어 우리나라를 포함한 전 세계 가 직면하고 있는 결핵관리의 핵심적 문제임 다약제내성 결핵 유병율 전세계 : 2004년 신규 또는 재치료환자 중 20 % 우리나라 : 2007년 결핵 신환자 중 13%

4 서론 신속내성검사: MDR-TB (LG 생명과학)
- Rifampicin, Isoniazid 약제 내성검사 - PCR기법을 기초로 하여 결핵균 약제 내성에 관련되는 유전자의 돌연변이를 검출하여 내성 결핵균 진단 - 2009년 6월부터 결핵연구원으로 의뢰 ( 2주 소요 ) - 2010년 11월부터 본원에서 시행 ( 1주 소요 )

5 신속내성검사방법 리팜핀 아이나 rpoB : RNA polymerase ß-subunit
katG : catalase peroxidase inhA : enoyl acyl ACP reductase ahpC : alkyl hydroperoxide reductase

6 Reverse hybridization line probe assay

7 재료 및 방법 대상: 2010년 11월 ~ 2011년 3월 중 분리된 MTB 84주 결핵연구원의 약제 감수성검사와 비교 본원
검사명 신속내성검사 약제감수성검사 검사방법 분자진단방법 절대농도법 검사소요시간 1주 4주 항결핵제 2종류 15종류

8 신속 내성검사 방법 [AdvanSureTM GenoScan] 총 검사시간: 5시간 소요 /3.5 hr PCR 30분 교잡반응
신속 내성검사 방법 PCR 교잡반응 세척 효소접합 반응 Drying /3.5 hr 30분 15분 총 검사시간: 5시간 소요 발색 반응 20분 [AdvanSureTM GenoScan]

9 Advansure GenoLine Scan

10 스트립 라인 1) 교잡반응 대조 프로브 : 교잡반응 적절성 여부 2) PCR 증폭 프로브 : 반응저해에 의한 위음성 결과
3) 결핵균 특이 프로브: 결핵균 여부 (ITS 부위) 4) 결핵균 비특이 프로브: 3)과 단일 염기서열 차이(one-base mismatch)  비정상적 교잡반응 온도에 의한 비특이성  동일 locus내 다른 자리 변이 유무 예측

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12 결과 보고 양식 Susceptible : No mutation Resistant
ex) - rpoB_D516V mutation (Rifampicin-Resistance) - rpoB_S531L mutation (Rifampicin-Resistance) - rpoB_H526D mutation (Rifampicin-Resistance) - katG_S315T mutation (Isoniazid-Resistance) - inhA_C-15T mutation (Isoniazid-Resistance) - ahpC_G-6A mutation (Isoniazid-Resistance)

13 결과 Rifampicin Isoniazid Rifampicin 본원 S R 결핵연구원 81 3 Isoniazid 본원 S R
3 Isoniazid 본원 S R 결핵연구원 72 1 11

14 신속내성검사 월평균건수

15 요약 신속내성검사의 월 평균건수는 2009년 10건, 2010년 16건, 2011년 23건으로 증가
신속내성검사의 월 평균건수는 2009년 10건, 2010년 16건, 2011년 23건으로 증가 본원에서 2010년 11월부터 시행함으로 TAT 향상과 수익 증대 효과 Rifampicin과 Isoniazid의 신속내성검사 결과 를 결핵연구원의 약제감수성검사와 비교해 본 바 높은 일치도 보임