현미경 및 실험기구 조작 부산대학교 신경과학연구실 생물관 311호.

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1 현미경 및 실험기구 조작 부산대학교 신경과학연구실 생물관 311호

2 실험 안전수칙 보호구 착용 음식물 섭취금지 세척 정숙 단정한 복장

3 현미경을 이용한 Brain sample 관찰
실험목표 피펫 조작법 익히기 광학 현미경 조작법 익히기 현미경을 이용한 Brain sample 관찰 저울 및 원심분리기 조작법 익히기

4 1. 피펫(Pippette) 2.1 피펫의 종류 스포이드 피펫 홀피펫, 눈금피펫 마이크로 피펫

5 1. 피펫(Pippette) 2.1 피펫의 종류 Micro pipette - 5000 ul(microliter)
Tip Pipette aid - 1ml ~ 100ml

6 1. 피펫(Pippette) 2.2 피펫의 사용법 ① 피펫으로 흡입 용량에 맞게 피펫을 고른다.
② 피펫의 종류에 맞는 팁을 끼운다. ③ 피펫으로 흡입할 용량을 조정한다. ④ 용액을 흡입한다. (First stop) ⑤ 원하는 곳에 다시 용액을 분주한다.(Second stop)

7 1. 피펫(Pippette) 2.2 피펫의 사용법 Frist stop Frist stop Second stop

8 1. 피펫(Pippette) 2.3 피펫 사용의 주의점 ① 오차가 있기 때문에 특정 용량에 맞는 피펫을 사용해야 한다.
② 한번 썼던 팁은 버린다. ③ 용액을 흡입 할 때 frist stop으로 흡입한다. ④ 용액을 과흡입하면 피펫이 오염되기 때문에 이후 단계에서는 그 피펫은 실험에 사용해선 안 된다.

9 2. 현미경 1.1 현미경의 종류 및 원리 광학현미경(Light microscopy) -명시야 현미경 -위상차 현미경
1.1 현미경의 종류 및 원리 광학현미경(Light microscopy) -명시야 현미경 -위상차 현미경 -형광 현미경 -편광 현미경

10 2. 현미경 1.1 현미경의 종류 및 원리

11 2. 현미경 1.1 현미경의 종류 및 원리 전자현미경(Electron microscopy)
1.1 현미경의 종류 및 원리 전자현미경(Electron microscopy) -투사전자현미경 (Transmission Electron Microscope, TEM) -주사전자현미경 (Scanning Electron Microscope, SEM)

12 2. 현미경 1.2 광학 현미경의 구성요소 ① 접안렌즈: 배율 x 10 ② 경통
1.2 광학 현미경의 구성요소 ① 접안렌즈: 배율 x 10 ② 경통 ③ 대물렌즈: 배율 x4, x10, x40, x100 ④ 조동나사 ⑤ 미동나사 ⑥ 재물대 ⑦ 광원장치 ⑧ 대물렌즈 교환기 ※광학현미경의 전체 배율: 접안렌즈 배율 x 대물렌즈 배율 ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦ ⑧

13 2. 현미경 1.3 광학현미경 사용법 ① 현미경을 안전한 곳에 위치시키고, 재물대를 가장 낮은 위치까지 내린다.
1.3 광학현미경 사용법 ① 현미경을 안전한 곳에 위치시키고, 재물대를 가장 낮은 위치까지 내린다.   ② 관찰할 슬라이드를 클립에 끼우고 x10 배율의 대물렌즈를 기본 렌즈로 돌려놓는다. ③ 조동나사를 사용해 재물대를 가장 높은 위치까지 올린다. (이 때 대물렌즈가 재물대가 닫지 않도록 잘 관찰 해야 한다.) ④ 대물렌즈를 통해 상을 관찰하면서 초점이 맞을 때 까지 조동나사를 돌리며 재물대를 천천히 움직인다. ⑤ 미동나사를 사용해 정확하게 초점을 맞춘다. ⑥ 관찰된 상을 사진찍은 후 다른 배율의 대물렌즈를 사용해 슬라이드를 관찰한다.

14 Brain section 관찰하기

15 Brain section 관찰하기

16 3. 질량과 무게 측정 4.1 저울 사용법 ① 저울을 바람이 불지 않는 평평한 곳에 놓고, 평형을 확인한다.
② 저울의 전원을 켜고, 유리문을 닫은 후 저울이 안정화 될 때까지 기다린다. (안정화 되면 화면에 * 모양이 뜬다) ③ 시약을 담을 기름종이, 튜브 등을 저울 위에 올리고 0점을 맞춘다. ④ 0점을 맞춘 후, 사용하고자 하는 시약의 무게를 측정한다.

17 3. 질량과 무게 측정 4.1 저울 사용법 평형을 맞추는 수은방울이 원의 가운데로 오도록 맞춘다.

18 4. 원심분리기(Centrifuge) 3.1 원심분리기의 원리 및 종류 원심력을 이용해 혼합되어있는 액체와
고체를 분리하거나 여과한다. ※RPM(Revolution per minute): 분당 회전수, 단위는 r/min 저속 원심분리기 : 6000rpm 고속 원심분리기 : 20000~25000rpm 초고속 원심 분리기 : 40000~80000rpm

19 4. 원심분리기(Centrifuge) 3.1 원심분리기의 사용법 ① 무게중심을 맞추어 원심분리기에 튜브를 넣는다.
② 뚜껑을 닫고 원하는 온도와 rmp, 시간을 입력한다. ③ 원심분리기를 작동시킨다. ④ 원심분리기가 모두 멈춘 후 뚜껑을 열어 튜브를 확인한다.

20 결과보고서 참고문헌을 참조하되 본인의 경험을 토대로 실 험기구의 사용법에 대해 토의(피펫, 현미경)
광학현미경을 사용하여 관찰한 표본의 전체적 인 윤곽을 그리고 표본의 성질을 간략히 기술. (특정부위의 명칭 2개 표시하기. x40, x100, x400 사진 각각 붙이기)

21 예비보고서 생물학적 완충용액(buffer)이란? 생물학적 완충용액을 사용해야 하는 이유
생물학적 기법에 사용되는 buffer와 그 buffer 를 사용하는 생물학적 기법의 예를 2가지 이상 기술