MGIT 960을 이용한 마이코박테리아 검출 미생물파트 이은자 2007. 11. 22.

결핵균(Mycobacterium tuberculosis)

결핵 발생 현황 (2004) (2004)

결핵 진단을 위한 검사법 객담도말검사 배양검사 흉부 X-RAY 조직검사 중합효소 연쇄반응(PCR)

CDC의 TAT 권장기준(1992) Report TAT AFB smear Within 24hrs Culture 14 Days Culture & ID 21 Days AST 28 Days ->형광법 및 집균법을 이용한 염색 액체배지와 신속 동정법 권장 분자생물학적 검사에 의한 결핵균 검출법

현행 검사 방법 도말검사: 형광염색 Ziehl-Neelsen 염색 배양: 고체배지( 3% Ogawa ) 8주 배양 동정: Niacin Test 감수성 시험: 결핵협회 의뢰 현재의 TAT: CDC 권장기준에 미달 배양: 평균 29일 동정: + 평균 10일 항균제 감수성: + 30일~70일

배경 TAT의 개선 양성율 향상 (특히 체액) 액체배지 평가: 적은 균수의 검체도 배양 잘 됨 모든 종류의 Mycobacteria가 잘 증식함. (고체배지-일부 균종은 억제-M. genavens) 치료중인 환자의 검체도 양성율 높음 추적관찰에 유용함

BACTEC MGIT 960

재료 및 방법 기간: 2007.6.10-11.05 검체: 총 356건 검체 전처리 동정 Body fluid: 153 건 Sputum: 203 건 검체 전처리 CDC 권장법: 4(6)% NAOH+2.9% Sod. Citrate Phosphate buffer로 중화 기존법: 4% NAOH 전처리, DW로 중화 동정 Niacin test PCR based MTB-ID®법(M&D, 한국)

검체도착 전처리 오염시 재처리 도말 제작 고체배지 액체배지 균양성 균양성 Niacin 동정 PCR 동정

Body Fluid 배양의 결과 MGIT Ogawa 양성 4 2 음성 147 151 오염 Total 153

CDC 법으로 전처리한 객담 배양 결과 MGIT Ogawa 양성 24 13 음성 51 64 오염 28 26 Total 103

기존방법으로 전처리한 객담 배양 결과 MGIT Ogawa 양성 44 41 음성 49 56 오염 7 3 Total 100

MGIT 960 오염검체의 분석 MGIT 오염시 검체를 재처리하여 마이코박테리아 자란 경우 : 3/40건 오염균 분석 3건 모두 NTM 오염균 분석 GPC>GNR>GPR>yeast+GPC,diph+GNR, GNR+GPC

양성율, 오염율 및 검출시간 비교 MGIT 960 OGAWA 양성율(%) 오염율(%) 검출시간(일) 2.6 1.3 14.0 FLUID 2.6 1.3 14.0 0.0 35.0 SPUTUM (CDC법) 24.3 27.1 9.0 12.6 25.2 21.0 (기존법) 44.0 7.0 8.7 41.0 3.0 20.4

배양법간 불일치건 분석 FLUID SPUTUM-CDC SPUTUM-기존 TB NTM Total MGIT(+), Ogawa(-) 2 7 1 12 MGIT(-), Ogawa(+) 3 9 15 비교 1 결핵균 불일치: 4/15 비결핵균 불일치: 11/15 비교 2 MGIT양성, OGAWA음성: 12/15 (결핵균-3, 비결핵균-9) MGIT음성, OGAWA양성: 3/15 (결핵균-1, 비결핵균-2)

TB와 NTM 검출율 비교 MGIT 배양 No (%) OGAWA 배양 AFB 도말 양성 음성 TB (45건) 44(98) 1(2) 42(93) 3(7) 35(78) 10(22) NTM (30건) 28(93) 2(10) 14(47) 16(53) 11(37) 19(63)

Niacin법과 PCR법의 동정 비교 PCR Total TB NTM Niacin 41 13 54

원가분석 기존: 수익 연 1억7200만원 체액만 MGIT 960 배양시: 700만원 지출 보험수가 연 건수 검사단가 1. 항산균 배양 및 동정 12060 16021 1115 2. 항산성 형광염색 집균도말 검사 3990 19577 218 3. TB-PCR hybridization 36130 1451 25773 4. 비결핵 마이코박테리아 25870 33 19687 5. 액체배지 배양 및 동정 7346 6. 약제 감수성 검사 28490 112 260

결핵검사실 비교 서울대 서울아산 삼성서울 강남성모 부산대 본원 배양법 Ogawa 법 MGIT + Ogawa Bact/Alert 동정 Gen-Probe PCR (씨젠사) (M&D) 호흡기: 로슈 비호흡기:바이오코어 ICT (SD) Niacin Test 검사건수 100건/일 100-150건/일 125건/일 50건/일 60건/일 70건/일 인원 2명 배양: 3명 동정:0.5명 PCR: 1명 1.5명

MGIT 960 사용시 전망 장점 단점 검출시간 단축 검출율 증가 오염율 증가 25.5일->10.6일 비용 증가 18.3%->23.6% 체액 결핵배양의 낮은 검출율 개선 단점 오염율 증가 9.4%->11.8% 비용 증가 체액만 적용 -> 700만원 모든 검체 적용 -> 12,700만원 Workload 증가 Careful handling 오염 재처리 기기양성시 도말검사 재실시 PCR