현미경 및 실험기구 조작 부산대학교 신경과학연구실 생물관 311호

실험 안전수칙 보호구 착용 음식물 섭취금지 세척 정숙 단정한 복장

현미경을 이용한 Brain sample 관찰 실험목표 피펫 조작법 익히기 광학 현미경 조작법 익히기 현미경을 이용한 Brain sample 관찰 저울 및 원심분리기 조작법 익히기

1. 피펫(Pippette) 2.1 피펫의 종류 스포이드 피펫 홀피펫, 눈금피펫 마이크로 피펫

1. 피펫(Pippette) 2.1 피펫의 종류 Micro pipette - 5000 ul(microliter) Tip Pipette aid - 1ml ~ 100ml

1. 피펫(Pippette) 2.2 피펫의 사용법 ① 피펫으로 흡입 용량에 맞게 피펫을 고른다. ② 피펫의 종류에 맞는 팁을 끼운다. ③ 피펫으로 흡입할 용량을 조정한다. ④ 용액을 흡입한다. (First stop) ⑤ 원하는 곳에 다시 용액을 분주한다.(Second stop)

1. 피펫(Pippette) 2.2 피펫의 사용법 Frist stop Frist stop Second stop

1. 피펫(Pippette) 2.3 피펫 사용의 주의점 ① 오차가 있기 때문에 특정 용량에 맞는 피펫을 사용해야 한다. ② 한번 썼던 팁은 버린다. ③ 용액을 흡입 할 때 frist stop으로 흡입한다. ④ 용액을 과흡입하면 피펫이 오염되기 때문에 이후 단계에서는 그 피펫은 실험에 사용해선 안 된다.

2. 현미경 1.1 현미경의 종류 및 원리 광학현미경(Light microscopy) -명시야 현미경 -위상차 현미경 1.1 현미경의 종류 및 원리 광학현미경(Light microscopy) -명시야 현미경 -위상차 현미경 -형광 현미경 -편광 현미경

2. 현미경 1.1 현미경의 종류 및 원리

2. 현미경 1.1 현미경의 종류 및 원리 전자현미경(Electron microscopy) 1.1 현미경의 종류 및 원리 전자현미경(Electron microscopy) -투사전자현미경 (Transmission Electron Microscope, TEM) -주사전자현미경 (Scanning Electron Microscope, SEM)

2. 현미경 1.2 광학 현미경의 구성요소 ① 접안렌즈: 배율 x 10 ② 경통 1.2 광학 현미경의 구성요소 ① 접안렌즈: 배율 x 10 ② 경통 ③ 대물렌즈: 배율 x4, x10, x40, x100 ④ 조동나사 ⑤ 미동나사 ⑥ 재물대 ⑦ 광원장치 ⑧ 대물렌즈 교환기 ※광학현미경의 전체 배율: 접안렌즈 배율 x 대물렌즈 배율 ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦ ⑧

2. 현미경 1.3 광학현미경 사용법 ① 현미경을 안전한 곳에 위치시키고, 재물대를 가장 낮은 위치까지 내린다. 1.3 광학현미경 사용법 ① 현미경을 안전한 곳에 위치시키고, 재물대를 가장 낮은 위치까지 내린다.   ② 관찰할 슬라이드를 클립에 끼우고 x10 배율의 대물렌즈를 기본 렌즈로 돌려놓는다. ③ 조동나사를 사용해 재물대를 가장 높은 위치까지 올린다. (이 때 대물렌즈가 재물대가 닫지 않도록 잘 관찰 해야 한다.) ④ 대물렌즈를 통해 상을 관찰하면서 초점이 맞을 때 까지 조동나사를 돌리며 재물대를 천천히 움직인다. ⑤ 미동나사를 사용해 정확하게 초점을 맞춘다. ⑥ 관찰된 상을 사진찍은 후 다른 배율의 대물렌즈를 사용해 슬라이드를 관찰한다.

Brain section 관찰하기

Brain section 관찰하기

3. 질량과 무게 측정 4.1 저울 사용법 ① 저울을 바람이 불지 않는 평평한 곳에 놓고, 평형을 확인한다. ② 저울의 전원을 켜고, 유리문을 닫은 후 저울이 안정화 될 때까지 기다린다. (안정화 되면 화면에 * 모양이 뜬다) ③ 시약을 담을 기름종이, 튜브 등을 저울 위에 올리고 0점을 맞춘다. ④ 0점을 맞춘 후, 사용하고자 하는 시약의 무게를 측정한다.

3. 질량과 무게 측정 4.1 저울 사용법 평형을 맞추는 수은방울이 원의 가운데로 오도록 맞춘다.

4. 원심분리기(Centrifuge) 3.1 원심분리기의 원리 및 종류 원심력을 이용해 혼합되어있는 액체와 고체를 분리하거나 여과한다. ※RPM(Revolution per minute): 분당 회전수, 단위는 r/min 저속 원심분리기 : 6000rpm 고속 원심분리기 : 20000~25000rpm 초고속 원심 분리기 : 40000~80000rpm

4. 원심분리기(Centrifuge) 3.1 원심분리기의 사용법 ① 무게중심을 맞추어 원심분리기에 튜브를 넣는다. ② 뚜껑을 닫고 원하는 온도와 rmp, 시간을 입력한다. ③ 원심분리기를 작동시킨다. ④ 원심분리기가 모두 멈춘 후 뚜껑을 열어 튜브를 확인한다.

결과보고서 참고문헌을 참조하되 본인의 경험을 토대로 실 험기구의 사용법에 대해 토의(피펫, 현미경) 광학현미경을 사용하여 관찰한 표본의 전체적 인 윤곽을 그리고 표본의 성질을 간략히 기술. (특정부위의 명칭 2개 표시하기. x40, x100, x400 사진 각각 붙이기)

예비보고서 생물학적 완충용액(buffer)이란? 생물학적 완충용액을 사용해야 하는 이유 생물학적 기법에 사용되는 buffer와 그 buffer 를 사용하는 생물학적 기법의 예를 2가지 이상 기술