8. 임상미생물 검사실의 안전 1장. 임상미생물 검사실의 조직과 주요업무 학습목표 생물학적 안전작업대의 사용방법 직원감염안전관리, 감시배양검사

1. 생물학적 안전작업대의 사용방법

병원성 미생물의 생물학적 안전등급 : 병원성 미생물은 생물학적 안전등급(biosafety level, BSL)을 가장 위해도가 낮은 BSL 1부터 위해도가 최고인 BSL 4까지 분류한다. 임상 검체에서 분리되는 주요 균종의 대부분은 BSL 2에 속한다.

5) 생물학적 안전 생물안전기준( biological safety level, BSL) ; 생물안전기준은 BSL-1, BSL-2, BSL-3, BSL-4로 구분된다.

(2) 생물안전작업대 o 생물안전작업대(biosafety cabinet, BSC)는 병원균으로부터 사람과 환경을 보호하기 위함. 미생물을 배양, 세포배양 임상미생물 검사실에서 임상검체를 처리하거나 특정한 감염성 병원균(예, 진균이나 결핵균)을 작업. 검사과정에서 에어로졸을 생성하는 경우(분쇄, 원심분리) o 생물안전작업대의 타입은 class I, II, III. BSC는 BSL-1에서 작업할 때는 필요하지 않다. class I는 생물학적으로 위험한 작업에는 추천되지 않는다. 임상미생물검사실에서 사용하는 것은 class II이다. class II는 BSL-2, BSL-3에서 작업할 때 필요하다. class III는 극도로 위험한 BSL-3, BSL-4를 배양할 때 필요하다.

생물안전작업대의 공기는 음압에 의해 수집되고, 수집된 공기는 헤파필터를 통해 배출된다.

4) 결핵균 부서의 특수 안전 고려사항 결핵균(M. tuberculosis)의 높은 감염성 때문에 결핵균 부서는 특수 안전예방책이 필요하다. 결핵검사실은 통행량이 적고 음압이 걸린 별도의 실험실. 실험실의 공기는 헤파필터를 통해 배기되어야 한다. 결핵검사실의 직원은 가운과 장갑을 착용한다. BLS-3결핵검사실의 직원은 눈 보호 장비, 특수마스크를 착용. 에어로졸을 막기위해 특수원심분리기 사용( 뚜껑있고, 냉장되는 원심분리기) 실험대에서 사용되는 모든 작업은 class II BSC를 준수 살균제는 반드시 결핵균 사멸성이어야 한다. 잔여 미생물을 제거하기 위해 결핵검사실 내에 근무자가 없을 때 자외선 멸균 결핵검사실의 직원들은 일년에 한번씩 피부검사로 결핵감염여부 확인(PPD)

< 의료폐기물 종류 (폐기물관리법 시행령 별표 2 관련) > 6) 위해 폐기물과 감염성 폐기물의 처리 계획 < 의료폐기물 종류 (폐기물관리법 시행령 별표 2 관련) > ① 격리의료폐기물 : 「전염병예방법」 제2조제1항에 따른 전염병으로부터 타인을 보호하기 위하여 격리된 사람에 대한 의료행 위에서 발생한 일체의 폐기물 ② 위해 의료폐기물 가. 조직물류폐기물 : 인체 또는 동물의 조직·장기·기관·신체의 일부, 동물의 사체, 혈액·고름 및 혈액생성물 (혈청, 혈장, 혈액제제) 나. 병리계폐기물 : 시험·검사 등에 사용된 배양액, 배양용기, 보관균주, 폐시험관, 슬라이드, 커버글라스, 폐배지, 폐장갑 다. 손상성폐기물 : 주사바늘, 봉합바늘, 수술용 칼날, 한방침, 치과용침, 파손된 유리재질의 시험기구 라. 생물·화학폐기물 : 폐백신, 폐항암제, 폐화학치료제 마. 혈액오염폐기물 : 폐혈액백, 혈액투석 시 사용된 폐기물, 그 밖에 혈액이 유출될 정도로 포함되어 있어 특별한 관리가 필요한 폐기물 ③ 일반의료폐기물 : 혈액·체액·분비물·배설물이 함유되어 있는 탈지면, 붕대, 거즈, 일회용 기저귀, 생리대, 일회용 주사기, 수액세트

6) 위해 폐기물과 감염성 폐기물 처리 : 미생물 검사실 ; 부식성, 유독성, 발암성, 가연성, 극도의 반응성, 방사능 노출, 감염성 폐기물을 포함한다. ; 처리지침에는 폐기물 취급방법, 보관방법, 표시방법, 관리방법, 처리방법 ; 미생물 검사실에서 발생한 감염성 폐기물은 고압증기멸균 또는 소각된다. ; 날카로운 것들은 찔림-방지 컨테이너가 반드시 준비 되어야 한다 : 감염성 물질은 오렌지색 봉지에 담아 멸균 후 의료폐기물통에 담아 버린다.

7) 화학물질의 안전성 임상미생물 검사실에는 여러 가지 위험한 화학물질들이 사용된다. 물질안전 지침서(MSDS, material safety data sheet)는 다음의 정보를 포함하여 화학물질에 대한 정보를 제공한다. 제품의 명칭과 사양 물리적 정보 등… 검사실의 출입문과 모든 위험 화학물질에는 국제화재방지협회의 위험순위라벨이 쉽게 인지될 수 있도록 부착되어 있어야 한다. 4개의 독립적인 구역을 갖고 있는 다이아몬드 모양의 라벨 청색 : 검강 위험 적색: 화재 위험 흰색 : 특수 위험 0 : 가장 약한 위험] 4 : 가장 심각한 위험

8) 화학적 연무 배출 후드 : 잠재적 위험성을 지닌 화학시약을 사용하는 작업은 유독하거나 위험한 연무를 배출하기 위해 연무 배출후드(chemical fume hoods)를 필요로 한다.

2. 직원감염 안전관리

I. 표준주의 ( Standard precautions) 지침 ; 병원균의 전염을 방지하기 위해 병원 환경에서 널리 사용되고 있는 법제화된 표준주의 지침 감염되었거나 감염되었을지도 모르는 환자로부터 감염원이 전파될 가능성을 줄이기 위함 모든 환자 처치 시 적용, 환자의 진단명이나 감염상태 등에 상관없이 적용 혈액의 포함여부와 관련 없이 혈액, 체액, 분비물에 적용 손상된 피부, 점막 등에 적용 ; 표준주의 지침은 기존의 일반주의 지침 전부를 포함하고 있다.

개인보호 장비/ 검체 이동 개인보호구(Personal protective equipment, PPE) 장갑 : 장감을 벗은 후에는 반드시 손을 씻는다. 가운과 에이프론 보안경, 고글 마스크 검체 이동 플라스틱 백에 검체를 넣어서 뚜껑있는 통에 담아 이동 Biohazard symbol 부착

3. 감시 배양 검사

감염감시 정의 감염감시(Surveillance)란… 감염의 분포와 위험요인을 조사하고 분석하는 체계적인 방법 문제를 해결할 수 있도록 분석 결과를 보고 및 전파하는 과정

감염 감시의 대상 사람 환경 : 감시 대상 균의 특성에 따라 환자와 주변 환자 주치의 및 간호사 환자 보호자 Acinetobacter : 싱크, 세면대, 액체 폐기물 등 Enterococcus : 화장실, 침대 손잡이, 사워기 등 Pseudomonas : 환자 주변 환경 모든 곳

감시 자료 미생물 배양자료 감시배양 자료 검체 자료 배양결과 항균제감수성결과 환경조사, 인적 관계 조사 등 종류, 채취 시기, 균명, 혼합배양 여부, 정도 항균제감수성결과 내성유전자 종류 감시배양 자료 환경조사, 인적 관계 조사 등

임상미생물학적 측면 - 미생물검사 검체보관 : 유행발생 감지시 미생물 동정 및 항생제 감수성 검사 Serotyping, plasmid analysis, phage typing, isoenzyme electrophoresis, genetic fingerprinting 등

임상미생물학적 측면 - 환경감시 미생물 환경이 전파 경로 역할을 한 것으로 추정되는 경우 실시 수액, water source 등 공기 매개 감염 유행발생시 공기처리시스템, 격리실의 공기 흐름 패턴 확인 무작위 환경배양 검사 금지: 검체에서의 양성배양 결과는 해석이 어려움 연구자 혼란 야기

공기(1) 공기배양검사(1) To monitor air quality - 건축이나 공사 시 - Airborne disease outbreak investigation : Aspergillus spp. Method - Volumetric sampling method : Air sampler - Settle plate method HEPA filter : 99.97% efficient removing particles ≥0.3㎛ in diameter.(e.g., Aspergillus spores are 2.5-3㎛ in diameter) Aseptic room, operating room, clean bench Recommended “Particle count” : class 100 Class(Clean room class) : US Federal Standard 209d ≥ 0.5㎛ft3

공기(2) 공기배양검사(2) Air sampler HEPA filter : 99.97% efficient removing particles ≥0.3㎛ in diameter.(e.g., Aspergillus spores are 2.5-3㎛ in diameter) Aseptic room, operating room, clean bench Recommended “Particle count” : class 100 Class(Clean room class) : US Federal Standard 209d ≥ 0.5㎛ft3

공기(3) 공기배양검사(3)