2% Ogawa medium+ Middlebrook 7H9-B broth 결핵균 배양 Sputazym Acidplus 2% Ogawa medium+ Middlebrook 7H9-B broth 검출율 상승 ⁃ 오염율 감소 SPCN의 검체가 많습니까? 오염되어 용해된 배지에서의 처리는 어떻게 하십니까? 현재의 오염율에 대한 객담 전처리법에 만족하십니까? SPUTAZYM (객담 핵까지 부드럽게 용해하는 효소) Acid Plus (Ogawa 배지용 최종 감균제) 2% Ogawa Medium Middlebrook 7H9-B broth (2% Ogawa배지와 조합 이중배지에 의한 검출율 상승 및 배양기간 단축) Sputamenzol (오염되어 용해된 Ogawa 배지에서의 계대배양) SPUTAZYM 80mLx10 SPUTAZYME(SAP: semi-alkaline protease객담용해효소)의 특징 효소의 작용에 의해 점액질 객담을 실온에서 신속하게 용해 균질화합니다. 객담 중의 세포 및 세균 수에 영향을 주지 않습니다. 객담 중 일반세균의 정량배양 및 세포진 검사에도 적합합니다. 객담 핵까지 균질화된 객담은 낮은 농도(최종 1%)의 NaOH로 충분히 살균 됩니다. ※ 객담 핵에 숨어있는 균은 통상의 NALC-NaOH에 살균처리되지 않기 때문에 배지가 오염되어 용해 현상이 일어납니다. ACID PLUS 200mLx1 OGAWA MEDIUM + M7H9b 500T, 1000T 항산균 검사 전처리법의 평가기준 객담의 육안적 성상은? (균질화의 문제) 도말 양성인데도 배양 음성검체가 많다.(전처리법과 배지 선택의 문제) 잡균오염이 3%를 초과한다.(전처리법의 문제) 배양 양성의 검출 시간이 느리다.(배지 선택의 문제) 의료진의 진단과 배양검사 결과의 일치율이 떨어진다.(전처리법과 배지 선택의 문제) SPUTAMENZOL 500mLx1

(SPUTAZYM + ACID PLUS 처리) 현재 사용중인 객담 전처리법 시험성적 2007년 권장법※1) 사용자 변법 검출율 SAP-NALC-NaOH법 동정균종 분리 건수 항산균 검출건수(검출율) MicoAcid A사 2%VIT배지b 2% Ogawa  액체배지 도말양성 M.tuberculosis complex 35 34( 97%) 30(86%) 30( 86%) NTMa 25 25(100%) 23(92%) 도말음성 6   6(100%)   5(83%) 19 18( 95%) 13(68%) 전체 41 40( 98%) 35(85%) 36( 88%) 44 43( 98%) 36(82%) a : Non-tuberculosis Mycobacteria b : VIT배지에 M7H9-B를 첨가한 2중배지   SAP-NaOH 변법 검 체(객담) 검 체(객담) 3배량 SPUTAZYM 첨가 ※2) 3배량 SPUTAZYM 첨가※2) Vortex mixer교반 20초 실온에서 15분 방치(때때로 혼합) Vortex mixer교반 20초 실온에서 15분 방치(때때로 혼합) 3000 Xg 20분 냉각원심분리 침사에 멸균증류수 1mL 첨가 배량의 NALC-NaOH(2%) 첨가 ※3) 2배량 2% NaOH 첨가 ※3) 검출 일 수   동정균종 항산균 검출일수(평균) MicoAcid A사 액체배지 2%VIT배지b 2% Ogawa 도말양성 M. tuberculosis complex     7~33(16.0) 13~46(25.0)   6~29(15.9) NTMa     5~16( 9.1) 10~48(24.0)   3~35( 8.1) 도말음성   13~30(21.0) 15~42(26.8) 19~35(20.5)     8~35(13.7) 16~48(31.8)   4~27(12.5) Vortex mixer교반 20초 실온에서 15분 방치(때때로 혼합) Vortex mixer교반 20초 실온에서 15분 방치(때때로 혼합) 0.067M 인산완충액(pH6.8)가득첨가 0.067M 인산완충액(pH6.8)가득첨가 3000 Xg 20분 냉각원심분리 3000 Xg 20분 냉각원심분리 침사에 인산완충액(pH6.8) 1mL 첨가 침사에 Acid Plus 2배량 첨가 ※4) 침사에 Acid Plus 2배량 첨가 ※4) 오염율 잡균수(오염율) MycoAcid (SPUTAZYM + ACID PLUS 처리) A사 액체배지 (SPUTAZYM 처리) 10(0.9%) 44(4.2%) n=1054 교반(실온) 10분 교반(실온) 10분 2% Ogawa 배지에 0.1mL 접종 2% Ogawa + M7H9 2중배지 0.3mL 접종 도말표본제작 (남은 검체 냉동보존) 2% Ogawa 배지에 0.1mL 접종 2% Ogawa + M7H9 2중배지 0.3mL 접종 도말표본제작 (남은 검체 냉동보존) ※1) SAP-NALC-NaOH :결핵균검사지침,(일본결핵병학회　항산균검사법검토위원회) ※2) SPUTAZYM : 객담에 다량으로 포함된 S-S결합을 환원해 SH HS-로 해리 객담 핵 용해 ※3) 구연산 나트륨 : 킬레이트제로 객담 중의 중금속 이온 제거(4% NaOH 와 2.9% Sodium Citrate 동량 혼합) ※4) Cetylpyridinium chloride : MGIT, BACTEC에서는 사용불가