Irregular Antibody Screening and Identification by AutoVue Innova -Tube method 에서 Automation method 로- 혈액은행파트 김 미

Blood Bank Automation 도입 2008년 Oct. 국내에서 최초로 사용. 검사가 가능한 항목 ABO/Rh 혈액형 판정 비예기항체 선별 및 동정 Antibody screening 검사 : 보험수가 6,838 원 Cassette 소모품 및 시약가 : 3,416 원 연간 수입 = 34,571건/년 x 3,422 원/건 = 118,289,330 원/년 교차적합시험 직접/간접 항글로불린 검사

Blood Bank Automation 도입 모든 혈액은행 검체 6ml EDTA tube 로 변경 비예기항체검사(선별) 인정기준 변경 (치료 기간 중 1회 → 3 일마다 1회 인정) ABO/Rh혈액형 검사의 경우 자동화 장비로 검사 한 후 임상병리사가 재검 → Cross checking (당직/야간 근무 시간에도 cross check 가능해짐) 비예기성 항체 검사가 실시간으로 이루어짐 인터페이스를 통한 결과 전송법을 이용함으로서 수기입력 error를 줄일 수 있음 Cassette 의 결과 image 그대로 오랜 기간 검사 결과 보관이 가능해짐

Automated Cassette Handling Automatic Sample Handling Automated Incubation of Cassettes Automated Cassette Handling Automated Reading and Interpretation Automated Reagent Handling

Autovue Type & Screening Operator Process Flow Patterns Everybody is Happy in BB.

FLOW CHART Antibody screening (0.5/0.5) by Ortho reagents (1st) Negative result Repeat again with Ortho reagents (2nd) Same results STOP Retest using DiaMed reagent Antibody Identification with Ortho reagents

A Panel Reagent Red Blood Cells 0.8% Resolve Antigram Antigen Profile Lot No. 8RA208 Exp. Date 2009-02-10 Donor Cell Rh-hr D C E c e f* C W V K k Kp a Kp b Js a Js b Fy a Fy b Jk a Jk b Xg a Le a Le b S s M N P Lu a Lu b Cell# AHG Number 1 1 R1wR1 1 4 7 8 2 + + + + + + + + + + + + + + + + + 1 + 2 R1R1 1 1 2 1 8 + + + + + + + + + + + + + + + 2 + 3 R2R2 1 2 2 3 6 + + + + + + + + + + + + + + + + + 3 + 4 Ror 1 1 2 8 5 6 + + + + + + + + + + + + + + + 4 5 r'r 1 1 2 8 5 3 + + + + + + + + + + + + + + + 5 + 6 r"r 1 9 1 7 5 + + + + + + + + + + + + + + + 6 7 rr 1 1 1 4 5 + + + + + + + + + + + + + + + 7 8 rr 1 1 1 2 2 4 + + + + + + + + + + + + 8 + 9 rr 1 1 2 8 8 + + + + + + + + + + + + + + + + 9 + 10 rr 1 1 1 9 2 5 + + + + + + + + + + + + + + + 1 + 11 R1R1 1 7 6 8 1 + + + + + + + + + + + + + + + + + 1 1 + Patient Cells Mode of Reactivity 3 7 ℃ / Antiglobulin Antiglobulin Variable Cold Var

자동화 전후의 비예기항체 선별검사 양성률 % Total No. tested No. of Positive 2007년 (DiaMed manual) 22,762 243 1.10% 2009년* (Ortho automation) 34,571 709 2.05% 저희 혈액은행 불규칙항체 검사 건수입니다. 2007년 건수를 뽑게된 이유는 이때 Diamed Gel test 로 시행하던 시기였고 2009년은 ortho 자동화 장비를 사용하던 시기였습니다. 검사 건수가 22000건에서 345건으로 많이 늘어나게 된 것은 불규칙항체검사(선별) 인정기준이 입원 기간 중 1회만 인정하던 것이 3 일마다 1회 인정하게 됬기 때문이다. 그런데 특이한 것은 2007넌 양성율이 1.1.% 이던 것이 2009년도에는 2% 가 되어 두배가 늘어 난 것입니다. * 불규칙항체검사(선별) 인정기준 변경 (입원 기간 중 1회 → 3 일마다 1회 인정)

연도별 비예기항체 검출 빈도 2007년 (DiaMed Column Agglutination) 2009년 (Ortho Column Agglutination) 항체종류 건수 % Anti-E+(c) 172 24.3% unidentified 218 30.7% Anti-Le(a) 110 15.5% Anti-E 58 8.2% Panagglutination 35 4.9% AHG 26 3.7% Anti-C+(e) 15 2.1% Anti-"E+c+Jka+?" 14 2.0% Anti-Fyb Anti-S Anti-Le(b) 10 1.4% Anti-C+e+ ? 8 1.1% Anti - M Anti-Jka+M 4 0.6% Anti-D 3 0.4% 합계 709 100.0% 항체종류 건수 % Anti-E+(c) 116 47.7% Panagglutination 28 11.5% Anti-E 13 5.3% AHG 14 5.8% Anti-Le(a) 8 3.3% Anti-C+(e) 9 3.7% E+c+Jka 7 2.9% Unidentified 29 11.9% Anti-D 4 1.6% Anti-S 3 1.2% Anti-C Anti-K 2 0.8% Anti-Jkb+? Anti- E+(c)+? 1 0.4% Anti- M Anti - S Anti - JKb Anti-Jka 합계 243 100.0%

2007년 2009년

이전에는 DiaMed gel cassette를 사용 * 이전에는 DiaMed gel cassette를 사용 * DiaMed gel cassette로 repeat한 결과 대부분 음성 혹은 동정 불가  Automation 시행 후, Anti–Lewis 와 Anti–M 등 Saline antibody(cold antibody)의 검출율이 높아져서, Irregular Antibody Detection Sensitivity 가 상승하였다.

2010년 월별 비예기항체 선별검사 양성율 Total No. tested No. of Positive 0.5 result 2007년 22,762 243 2009년 34,571 709 2010년 3월 3,109 65 (2.1%) 20 (30.7%) 2010년 4월 2,789 78 (2.8%) 26 (33.3%) 2010년 5월 2,903 131 (4.5%) 53 (40.5%) 2010년 6월 2,958 81 (2.7%) 18 (22.2%) 2010년 7월 2,975 112 (3.8%) 28 (25.0%) 2010년 8월 2,356 87 (3.7%) 10 (11.4%)

그런데 0.5 weak positvie 가 5월에는 하루에도 적게는 5개에서 많게는 10건까지 나타나게 되었고 이것을 ID했을때 Anti-Le와 같이 항체가 동정되는 경우도 있었지만 대부분이 동정이 안되는 경우가 많았습니다.그래서 이를 해결해야 할 문제로 생각하게 되었습니다.

Problem solving Are they clinical significant antibody? Do we need the detection of cold antibody? How can I solve these problems? Recommendation : Polyspecific cassette IgG cassette (IgG + C’) (IgG) 우리가 검출되고 있는 weak 양성인 검체가 임상적으로 수혈에 문제를 유발하는 임상적으로 의의가 있는 항체인지? 또 cold antibody 를 어디까지 검출해서 반영할 것인지? 그리고 이렇게 weak postivie 가 많이 나올때 어떻게 해결할 것인지를 의논하기 시작했습니다. 첫번째 회사에서 제시한 방법이 우리가 사용하는 cassette 에는 IgG와 complement 가 들어가있는 poly cassette를 쓰는데 이를 IgG specific cassett를 사용한다면 cold antibody 가 많이 배제될 것이라는 제안을 듣고 Poly IGG 로 변경하는 방법을 시도하였습니다.

Poly cassette  IgG cassette Polyspecific IgG cassette ID Cell I Cell II 1 Negative Positive 2 ? 0.5 항체 미약하여 동정불가 3 TMC 4 5 6 0,5 Anti-Le(a) 7 0. Non ID 8 9 10

결 론 Poly cassette 와 IgG cassette 의 차이는 없었음. 결 론 Poly cassette 와 IgG cassette 의 차이는 없었음. RBC reagents가 4-5월에 호주에서도 위양성 문제가 있었다고 하여, 현재 우리가 사용하던 RBC reagents Lot No. 를 본사에 의뢰한 상태임. 8월부터 0.5 weakly positive 건수가 많이 감소하여 RBC reagent 문제의 가능성도 배제하지 못함. DiaMed 시약에 비해 anti-Lea 등 cold antibody 계열의 항체를 많이 검출하고 있음. 임상적으로 의의가 있는지 여부는 현재 결정하지 못했으나, 일단 양성인 경우는 의미 있는 항체로 해석하여 Lewis 항원 음성 혈액을 찾아 출고하고 있음.