장구균 (Enterococcus)의 간이동정법 임상병리과 김선희
Catalase 음성 그람양성 구균 Streptococcus Enterococcus Lactococcus Aerococcus 균속 세균의 배열 Vanco-mycin 감수성 Glucose 가스 증식 주로 분리되는 검체 연쇄 쌍 사련 불규칙 6.5% NaCl 45℃ Streptococcus + - S V 사람과 동물 Enterococcus S/R Lactococcus 우유 Aerococcus 공기 Pediococcus R 발효식품 Leuconostoc 식물
장구균 I Gram (+) cocci 정상 상재균: 위장관계와 여성 비뇨생식계 건강인의 97%가 장내 보균자이며 병원성이 약함. 병원감염 - 4th common pathogen in US (1990-1992) - 3rd common bacteria in Severance hospital (1995) 균혈증, 심내막염, 요로감염 등을 유발
장구균 II 최근 장구균의 분리 증가 - ’85 약 500주의 장구균이 분리 되었으나 최근 3년간에는 연간 약 2000주 이상 분리 되고 있음. - Cephalosporin 등에 자연내성 - 원내감염 증가
Vancomycin-resistant enterococcus (VRE)의 증가 VRE in US - 0.3% (1989) 7.9% (1993) - ICU: 0.4% (1989) 14% (1993) VRE in Severance - 0.1% (1997) 5.2% (1998) 10% (1999) - 임상적으로 문제가 되는 VRE가 본원에서는 ’95 12월 처음으로 분리된 이래 최근에 급격히 증가.
기존의 간이동정법 1차 시험 2차 시험 문제점 - Bile esculin azide agar (BEAA) - Raffinose 1차 시험 2차 시험 - Streptococcus fecalis (SF) - Arginine dihydrolase - Bile esculin azide agar (BEAA) - Raffinose - Mannitol - Arabinose - Tellulite - Lactose - Motility - Pigment 문제점 - Tellulite 내성시험: 접종량에 따른 결과 판독의 어려움 E. gallinarum E. faecalis로 동정하는 예가 있었으므로 이에 대한 보완이 필요하다고 생각.
주요 장구균의 생화학적 특성 Species Tell. Mot. MGP Pig. Ara. E. faecalis + - E. faecium E. casseliflavus E. gallinarum MGP: methyl alpha-D-glucopyranoside
Cumulative No. (%) positive at MGP와 Motility 시험의 비교 Species (No. tested) Cumulative No. (%) positive at MGP Motility 24 hr 48 hr 1 wk EFM (8) 0 (0) ECA (9) 9 (100) 8 (89) EGA (14) 14 (100) 10 (71) 12 (86)
재료 및 방법 2000년 2-4월 세브란스병원 환자에서 분리된 장구균 443주 세균 동정 - 변경된 간이동정법 * 1차 시험: SF, BEAA, Mannitol, Tellulite, Sorbose, MGP, Pigment * 2차 시험: Arginine, Arabinose, Raffinose, Sucrose - Vitek GPI * 변경된 간이동정법에서 드문균주 분리시 * 기타 이유로 확인이 필요한 경우
변경된 간이동정법
임상검체에서 분리된 장구균 YUMC 2000.2-4월
변경된 간이동정법으로 동정안된 균주 간이동정법 Vitek GPI 감별시험 Final ID E. hirae EFM 73%, E. avium 22% Arabinose (+) EFM EFM 98% E. garvieae ECA/EGA 99% MGP (-) No ID E. malodoratus ECA 99% Enterococcus spp. EGA 54%, E. avium 29%
결 론 기존의 간이동정법 - EGA EFA로 잘못 동정 가능 변경된 간이동정법 - MGP 시험을 추가 EFA, EGA & ECA의 효과적 동정 가능 - VanC (EGA & ECA)를 다른 균종과 감별시 운동성보다 MGP 시험이 더 정확하다고 판단.