van Deemter 식을 이용한 기체크로토그래피의 최적화
실험목적 기체크로마토그래피법의 봉우리가 넓어지는 이유를 이해한다. Van Deemter 식의 각 항의 의미를 알아봄 유량과 분리도와의 관계를 구함 최적유량의 도출과 실제적 크로마토그래피의 유량 선정법 알기
van Deemter 식 H = A + B/v + C v H ; Height Equivalent to Theoretical Plate (이론단 높이)
A 항 ; 다통로에 의한 띠 넓어짐 효과로 흐름속도에 무관하며 B/v 항 ; 세로확산에 의한 띠 넓어짐 효과로 흐름속도에 반비례하며 C v 항 ; 평형시간에 의한 띠 넓어짐 효과로 흐름속도에 비례한다
크로마토그램과 분리능
칼럼의 분리효율 이론단수(N)= L/HETP 이론단수(N)=16․ (tr/W)2
기기 및 시약 기체 크로마토그래피 장치 헵탄
크로마토그래피 사용법 운반기체를 약 60ml/min 으로 조절한다. Main Power을 On으로 하고 온도조절 놉을 35-40 정도의 위치에 두어 오븐을 가열시킨다.(약 1시간의 가열시간 필요) 일정온도 도달 후 운반기체의 유량을 정확하게 맞춘다.(A, B의 유량은 비슷하게 유지한다) 검출기 스위치를 On 으로 하고 전류를 150mA 로 조절한다.
5. 기록기(챠트레코더)를 On으로 하고 검출기의 balance를 맞춘다 5. 기록기(챠트레코더)를 On으로 하고 검출기의 balance를 맞춘다.(검출기 polarity를 +, -로 전환할 때 기록기의 움직임이 없어야 한다) 6. Attenuator를 8이나 16의 위치에 두고 시료를 주입하여 크로마토그램을 얻는다.
실험방법 1. 크로마토그래피 장치를 일정 온도로 유지시킨다.(온도조절다이얼은 일정온도에 도달한 다음 움직이지 않도록 한다) 2. 유속을 15ml/min 정도로 유지시킨 후(A, B column 모두) 장치의 balance를 맞춘 다음 base line이 안정화 되도록 기다린다. 3. 시료 2㎕(attenuator는 8의 위치에 둔다)를 주입하여 크로마토그램을 얻는다.
4. 유속을 25 ml/min으로 한 다음 같은 조작을 반복한다. 5. 유속을 40ml/min, 60ml/min, 80ml/min, 120ml/min, 150ml/min 으로 하여 반복하여 크로마토그램을 얻는다. 6. 얻은 크로마토그램으로부터 N 값을 구하고 H를 계산한다.(칼럼 길이는 120cm) 7. 유속에 대하여 H값이 어떻게 달라지는지 그래프로 그린다. 8. 최적 유속을 구한다.
이론단 높이를 구한 후 유속에 대하여 도시한 다음 최적 유속을 구한다. 유속 (ml/min) 머무른 시간(tr) 봉우리폭 (W) 이론단수 (N) 이론단 높이(H) 15 30 50 100 150 이론단 높이를 구한 후 유속에 대하여 도시한 다음 최적 유속을 구한다.