패류의 세균성 질병 이승혜 이정민 이희준 임수진 장기성 패류의 세균성 질병 1. 노카르디아병 (Nocardiosis)2. 유생 Vibrio 병 (Larvel and juvenile vibriosis)3. 인대병 (Hinge ligament disease)4. 오분자기.

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2 패류의 세균성 질병 이승혜 이정민 이희준 임수진 장기성

3 패류의 세균성 질병 1. 노카르디아병 (Nocardiosis)2. 유생 Vibrio 병 (Larvel and juvenile vibriosis)3. 인대병 (Hinge ligament disease)4. 오분자기 (sulculus divericolor supreatexa) 비브리오병 5. 바지락의 비브리오 병 (Brown ring disease, BRD)

4 1. 노카르디아병 (Nocardiosis) 방선균류에 속하는 진균 곰팡이의 일종 감염개체 : 외투막, 아가미, 부착근, 심장의표면 특징 : 직경 1 cm 정도의 원형의 노란 색 또는 갈색의 결절이 생김진단 : 병소의 결절을 떼어 내어 그람염색하면 양성의 분지된 사상균을 확인병리조직학 : 그람양성, PAS 양성의 분자상의 호염기성세균의 집락이 침윤

5 1. 노카르디아병 (Nocardiosis) 1. 부착근 (A), 체벽 (B) - 부착근과 체벽의 감염병소 2. 병소표본의 그람염색 그람염색에 강한 양성반응을 보임 HE 염색보다 식별이 용이하다.

6 2. 유생 vibrio 병 (Larvel and juvenile vibriosis) 종묘생산장의 유생에서 빈발하는 질병. 특징 : 면반 모양이상, 면반의 확장 및 탈락 증상 : 부화유생은 섬모운동 → 정지. 패각부위 괴사. 섬모충의 증식진단 : Tryphane blue 를 떨어뜨려 위상차 현미경으로 관찰. 감염개체 식별용이 감염경로 : 해수 또는 먹이를 통해 감염됨.

7 Tryphane blue 에 진하게 염색되는 괴사개체 ( 좌 ) 정상개체 ( 우 ) ↑ 위상차 현미경 X900 좌 : Tryphane blue 에 진하게 염색되는 외투막의 과시부 우 : 괴사 탈락된 외투막 조직의 측면도 ↑ 위상차 현미경 X700 2. 유생 vibrio 병 (Larvel and juvenile vibriosis)

8 병리조직학 1. 외투강내의 외투막이 탈락. 2. 세균의 집락이 형성되어 외투막을 따라 안쪽 패각으로 침입 3. 세균의 집락은 섬모가 탈락한 경우, 면반의 기부, 면반의 하부에서도 발견됨 4. 감염개체의 위, 소화관맹낭 및 장과 같은 소화관계에는 비정상적으로 대형의 수많은 지방공포가 관찰 5. 소화관 내부에서는 먹이를 찾아볼수 없다. 6.TCBS, Marine agar 를 사용하여 균을 분리하면 Flavobacterium, Pseudomonas 또는 Vibrio 가 분리된다. 7 Vibrio 는 유생 또는 치패에 치명적인 외독소를 생산하는 vibrio tubiashii 와 성상이 거의 비슷하다.

9 2. 유생 vibrio 병 (Larvel and juvenile vibriosis) 예방법. 1. 모패 사육조 또는 유생 사육조에 chroramohenicol 10-50ppm 을 살포 2. 사육수중의 균수는 10²/ml 로 유지 3. 먹이나 공습수도 소독하여 균의 유입을 방지.

10 2. 유생 vibrio 병 (Larvel and juvenile vibriosis) 인공 종묘생산후 8 일경의 굴치패 A: 병든치패는 섬모가 탈락하고 그부분에 과립상의 물질이 모여있는 것으로 종묘생산과정에 세균성질병 ( 유생비브리오병 ) 흔히 보이는 증상을 나타내고 있다. B: 건강한 치패는 면반부위에 섬모의 배열이 규칙성이 있고 활발히 운동하고 있으며 A 에서와 같은 과립상의 물질은 면반 부위에서 발견할수 없다. 외투강내에 괴사 탈락된 외투막 세포와 패각에 부착된 세균. B: 세균, MC: 외투강 PER: 각피층 (Periostracum) Tolidine blue 와 염기성 fuchin ↑x1500

11 소화관계 세포내에 대형의 공포 DG: 소화선 MA: 외투막 S: 위 SS: 맹낭, VC: 내장강 Tolidine blue ↑x1000 소화선 세포 흡수세포의 기저부에 보이는 대형의 공포, VC: 내장강 Tolidine blue ↑x1000 2. 유생 vibrio 병 (Larvel and juvenile vibriosis)

12 3. 인대병 (Hinge ligament disease) 참굴이나 넓적굴의 인대가 붕괴대는 병. 인대는 패각의 개폐에 관계 폐사된 개체를 보면 붕괴된 인대 주변에 vibrio 균이 우점종으로 나타난다. 인대의 붕괴는 패류의 생리적 장애를 초래하여 생잔률에 직접적인 영향을 미친다. 인대의 붕괴는 패류의 생리적 장애를 초래하여 생잔률에 직접적인 영향을 미친다.

13 참굴의 인대. LR: 인대 탄체, PS: 외투강, SLS:sescretory subligamental ridge LV: 좌각, RV: 우각 DG: 소화선, SLR 은 탄체의 안쪽과 접해있고 탄체나 외투강에는 균의 집락이 발견되지 않음 감염개체의 인대. 세균의 침입에 의해 인대는 거의 붕괴되어 있 다. 원인균은 붕괴된 탄체의 바깥 부분으로 실모양으로 뻗어있다. 탄체는 괴사되어 외투강에 의해 격리되어져 있고, 외투강 내에는 많은 균과 유리세포가 존재한다. 2. 유생 vibrio 병 (Larvel and juvenile vibriosis) 3. 인대병 (Hinge ligament disease)

14 Vibrio 에 의해 인대가 용해된다. 감염 초기에는 cytophaga, flexibacter 또는 flavobacterium 장간균 관찰 감염개체 인대의 외부에 세균의 집락이 관찰 감염된 탄체 (resilium) 에도 붕괴가 일어난다.

15 외투강내의 세균증식에 대한 참굴의 숙주반응 패각과 외투상피 사이에 있는 외투강내에 많은 세균의 집락이 관찰되며, 굴의 혈구는 외투막 상피세포의 기부에 모여있고, 외투강 내 에 있는 세균을 탐식하기 위하여 외투막의 상피를 통하여 유주하고 있다. V: 패각 PS: 외투강 ME: 외투상피 2. 유생 vibrio 병 (Larvel and juvenile vibriosis) 3. 인대병 (Hinge ligament disease)

16 4. 오분자기 (Sulculus diversicolor supreatexa) 비브리오병 여름철에 발생하는 질병. 감염개체는 은신처 밖으로 나온 체 광기피현상을 나타내지 않으며 부착능력이 감소되어 죽게된다. 발병시의 수온 : 21C 각장 20mm 정도인 치패에 주로 발생,40mm 인 것에서도 발생하며 누적사망률은 15% 정도

17 4. 오분자기 (Sulculus diversicolor supreatexa) 비브리오병 발병하면 2~3 일 이내에 폐사 병든 개체는 족부에 직경 1~3mm 의 백색 반점이 생기는 것이 특징 병리조직학 적으로는 근섬유의 변성과 괴사 및 공포화 이러한 변화는 소화선에서도 찾아볼 수 있다.

18 4. 오분자기 (Sulculus diversicolor supreatexa) 비브리오병 A: 족부의 백점병소.10nm B: 병소의 괴사와 공포,HE,200um C: 병소내의 세균, 김자염색, 20um

19 4. 오분자기 (Sulculus diversicolor supreatexa) 비브리오병 1. 0.2% bezalkonium chloride 액에 2 분간 담군후 70% 알콜면으로 소독 2. 환점을 포함하는 병소부위의 근육을 소독한 면도날로 절개 3. 상처를 통하여 빠져나오는 체액을 백금이로 채취 4. 식염을 2% 첨가한 TSA 에 접종하여 25C 에서 25 시간 배양 병원균 분리.

20 4. 오분자기 (Sulculus diversicolor supreatexa) 비브리오병 1.0.5~0.8 X 1.5~5.8 um 의 크기인 그람음성균. 1 개의 극편모를 가진다 2. 상어의 괴양병과 능성어의 장염의 원인균과 같은 vibrio carchariae 3. 인공감염은 마리당 10 ⁸ cells 을 족부에 주사하면 3 일 이내에 폐사 4. 사육수에 4.5 ｘ 10 ⁶ cells/ml 가 되게 균을 첨가 분리균.

21 4. 오분자기 (Sulculus diversicolor supreatexa) 비브리오병 5. 첨가후 5 시간 또는 24 시간 침지시키면 각각 4 일과 6 일 후에 폐사 6. 최종폐사율을 40% 와 20% 이다. 병리조직학 적으로는 근섬유의 변성과 괴사 및 공포화가 생김. 이러한 변화는 소화선에서도 찾아볼 수 있다. 분리균.

22 5. 바지락의 비브리오 병 (Brown ring disease, BRD) 현재는 프랑스와 스페인 지역에서 발생 이 병의 외관상의 특징 패각의 안쪽에 있는 pallial line 과 패각의 바깥쪽 사이에 갈색의 침전물인 conchiolin 이 침착 1988 년 여름에 스페인에서 처음 발생

23 5. 바지락의 비브리오 병 (Brown ring disease, BRD) 원인균은 vibrio tapetis 수온 20C 이하의 저수온기인 겨울과 봄 가을에 발생할 가능성도 있다. 갈색반점이 형성되는 것은 다른 와편모조류의 감염에 의해서도 발생함 우리나라에서 발병은 아직 확실하지 않다.

24 바지락의 패각 안쪽에 갈색의 conchiolin 이 침착된 Brown ring disease (BRD) 5. 바지락의 비브리오 병 (Brown ring disease, BRD)

25 사망률은 거의 60% 정도 감염개체는 대게 펄에 잡입 하지 못한다. 바깥에 노출되어 있거나 잡입한다 하더라고 깊숙이 잡입하지 못한다. 감염된 개체는 성장이 느리고 패각에 변형이 생김.

26 5. 바지락의 비브리오 병 (Brown ring disease, BRD) ③두께가 1 mm 이하인 반점이 형성된 단계 ④ 1mm 이상의 큰 반점이 형성되는 단계 ②육안으로 미세한 갈색의 침전과 소수의 갈색 반점이 확인되는 단계 conchiolin 이 침착되는 과정 ①육안으로 확인할 수는 없지만 현미경으로 확인할수 있는 단계