Protein
1. 단백질(Protein)의 분류 2. 단백질 (Protein)의 생물학적 기능 3. 단백질(Protein)의 측정법 4 1.단백질(Protein)의 분류 2.단백질 (Protein)의 생물학적 기능 3.단백질(Protein)의 측정법 4.단백질 (Protein) 분획
단백질의 분류 단순단백질 (Simple Protein) 결합단백질 (Conjugated Protein) 유도체단백질 α1-Globulin α2-Globulin β-Globulin γ-Globulin Albumin Globulin Histones 그 밖에: Metalprotein , Phosphoprotein , Chromoprotein 단순단백질 (Simple Protein) Glycoprotein Lipoprotein Nucleoprotein 결합단백질 (Conjugated Protein) Dipeptide Tripeptide Polypeptide Peptone 유도체단백질 (Derivative Protein) Fibrinogen Transferrin Ceruloplasmin 특수단백질 (Special Protein)
단백질의 생물학적 기능 1)영양원 2)삼투압 유지 3)물질운반 작용 4)혈액 pH의 유지 : 산염기 평형 유지 , 완충 작용 5)면역 작용 : 항체 작용 6)혈액응고 작용 7)효소반응 작용 : 촉매 작용 8)호흡 작용 : CO2의 운반
Micro Kjeldahl 법 (질소 정량법) 단백질의 측정방법 적정법 비색법 Micro Kjeldahl 법 (질소 정량법) Biuret 법 단백질의 질소함유율이 거의 일정한 것을 이용해서 질소를 측정한 후 계수 6.25를 곱해서 단백질의 양을 구한다 단백용액을 알카리용액에서 Cu+2로 처리하면 Chelate Complex가 생기는데 이와 유사한 반응이 유기화합물질인 Biuret과 Cu+2 사이에 일어나기 때문에 Biuret 반응이라 하며 이반응은 Amino acid나 Dipepide하고는 반응치 않으며 Tripolypeptide 이상에서 반응을 해서 Reddish pink Color를 낸다
Micro Kjeldahl 법 (질소 정량법) Biuret 법 ①1단계 : 산화 Protein + H2SO4 → (NH4)HSO4 ↑ Boiling , 산화 ②2단계 : 증류 (NH4)HSO4 + NaOH → NH3 Alkali , 증류 ③3단계 : 포집 NH3 + H3BO3 → NH4H2BO3 → NH4+ + H2BO3- ④4단계 : 적정 NH4+에 Methyl red를 가하면 Red Color로 변한다 여기에 HCl을 가하여 Red Color가 소실될 때 까지 적정한다 (적정량을 측정한다) ①1단계 : Biuret 반응 Alkali 용액 하에서 (NaOH) Protein + Biuret 시약 → Violet Complex (청자색의 복합체 형성) ②2단계 : Salting Out (염석) Violet Complex + Sod. sulfate-sulfite → Globulin 침전 ③3단계 : 원심분리 2단계 까지의 용액에 Ether를 첨가하여 원심분리 하면 상층 : Ether , 중간층 : Globulin , 아래층 : Albumin 으로 분포한다 ④4단계 ⓐPipette으로 Albumin층을 취하여 측정 ⓑTotal Protein은 Violet Complex에 Sod. sulfite를 첨가하여 20분 방치 후 측정
단백질의 분획 Albumin α1 α2 β γ 전기영동시 Supporting Media + - Globulin
단백질의 분획 단백질 분획 Albumin α1-Globulin α2-Globulin β-Globulin γ-Globulin 정 상 치 50～65% 2～6% 4～8% 8～15% 12～20% 구 체 적 성 분 Pre-Albumin α1-Acid glycoprotein α1-Antitrypsin α1-Lipoprotein (HDL) α1-Fetoprotein Mucoprotein α2-Macroglobulin Haptoglobin Ceruloplasmin Glycoprotein Prothrombin β-Lipoprotein (LDL) Preβ-Lipoprotein (VLDL) Transferrin Hemoglobin (Hemopexin) C3 Complement C4 Complement CRP IgG IgM IgA IgD IgE