Lecture 6 Introduction to Hematology; Anticoagulants; Blood Collection 대학서림 핵심임상혈액학, 2018 제1장 (Rodak Hematology 5th Ed, 2016, Ch 2, Ch 3) Kyung Jin Cho, PhD, Prof Emeritus Korea University, College of Health Sciences chokj@korea.ac.kr April 12, 2019

혈액채혈과 항응고제 제1장 1절, 2절 p12-26

√ 혈장 vs. 혈청 항응고 처리한 혈액 항응고처리 안한 혈액 항응고 처리한 혈액 항응고처리 안한 혈액 http://microbiologynotes.com/tag/difference-between-plasma-and-serum/

Anticoagulants (항응고제) 항응고제 종류 항응고제 기능 EDTA (Ethylendiaminetetraacetate) √“선택적 항응고제” (Short Draw: 상대적 과다한 EDTA → 적혈구 수축) Liquid: K3EDTA (glass) Spray-coated: K2EDTA (plastic) (Na2 보다 K2가 용해 빠름) Sod citrate: 응고인자활성감소로 응고검사실에서 활용 √ EDTA, Sod citrate, Oxalate, ACD 등은 모두 칼슘소비로 응고억제 √ ACD: RBC영양소(저장혈액용) √ SPS: blood culture용 (특정항생제 활성감소; 보체, 탐식작용 억제) Sodium citrate: √ Sod Citrate: Blood =1 : 9* (Westergren ESR, 1 : 4 ) *EDTA사용시 혈소판 위성현상 나타나면, Sod Citrate 튜브사용; 혈구계산 후 보정 (x 10/9) 필요 Potassium Oxalate Acid Citrate Dextrose (ACD) Sodium Polyanethol Sulfonate (SPS) Heparin √Heparin은 thrombin중화 작용에 의해 응고억제

기타 첨가물 당분해억제 성분 Clot activators(응고촉진성분) Separator gels √Sodium fluoride(Glycolytic inhibitor)와 항응고성분 oxalate (lithium heparin)함유 Clot activators(응고촉진성분) Silica, thrombin plastic tube내에서 응고 촉진 Separator gels 원침하면 혈구와 혈청을 분리시키는 불활성 물질 혈액은행에서 사용 하면 안 됨 http://fisherfast.fishersci.ca/ productDetails_PROD_4901639 https://www.thomassci.com/scientific-supplies/Plasma-Separation-Tube BD Vacutainer® PST™ Tubes contain spray-coated lithium heparin and a polymer gel for plasma separation. Samples processed in these tubes are used for plasma determinations in chemistry. BD Vacutainer® PST™ Lithium Heparin Tubes eliminate the need to wait for a clot to form, making it an ideal tube for STAT procedures, as well as for patients receiving anticoagulant therapy. They provide the convenience of gel separation with the added advantage of improved turnaround time

“Order of Draw” Blood Collection* √ (채혈 시 진공튜브사용 순서) *: Reference: Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Collection of Diagnostic Venous Blood Specimens; Approved Standard. 7th ed. CLSI document GP41. Wayne, PA: CLSI; 2017.

√ “Order of Draw” Blood Collection* *: Adapted from BD Vacutainer® Venous Blood Collection Poster

Minimum & Maximum Fill Indicator in Sod. Citrate Tube √ Short draw in PT, aPTT 검체: 상대적으로 Sod citrate 항응고제 과다로 시약 내 Ca++소비하여 PT, aPTT 연장 https://www.wisconsindiagnostic.com/content/Citrate_Tube_Notice.pdf

정맥채혈과 모세혈관채혈 대학서림 핵심임상혈액학 1장 1절

Safety(안전관리) √ 혈액-유래 감염원 √ Handwashing(수세) 표준방어지침(Standard Precautions-OSHA*) 준수 √ 혈액-유래 감염원 HBV, HCV, HIV, 기타 감염경로 비경구적 경로(경피적) 점막 경로 √ Handwashing(수세) √ PPE: 장갑, 청결한 labcoat 착용 사용한 주사바늘 및 예리한 물질은 Biohazard표지된 쉽게 뚫리지 않는(puncture proof) 폐기물용기에 폐기 Occupational Safety and Health Administration *: Occupational Safety and Health Administration

감염관리 감염관리 지침과 요령 준수 환자간 감염전파를 막기 위해 환자가 바뀔 때 마다 손 씻기와 새 장갑 착용 환자간 감염전파를 막기 위해 환자가 바뀔 때 마다 손 씻기와 새 장갑 착용 손씻기는 감염방지 수준으로 청결한 겉 옷(Lab coat)과 단정한 외모 유지 격리환자 접할 때 필요하다면 추가적 PPE착용

채혈준비물 실험대 소독 위한 Alcohol spray Alcohol sponge; 멸균거즈; spot 반창고 Needle, lancet, capillary tube등 sharps container Tourniquet; Cushion 멸균 Lancet; Capillary Tubes 채혈용 진공튜브(lavender top, blue top, yellow: 검사목적) Needle holder Needle (21-23G) Tube rack

- 서 있거나, 앉은 자세: 혈관→조직 수분 이동 (누운 상태 보다 농축 됨) 검사결과에 영향 미치는 생리학적 요인 채혈 시 환자의 자세 - 서 있거나, 앉은 자세: 혈관→조직 수분 이동 (누운 상태 보다 농축 됨) 일주기성 생리적 리듬 (diurnal rhythm) - 주야에 따라 혈액 농축도 변화 (Cortisol 오전; 혈청 철 오후 높음) 운동 후: 근육 활성 CK, creatinine, AST, LD, Protein 증가; 응고활성화; PLT, WBC↑ 스트레스: WBC↑ Diet: 채혈 전 8 시간 이전 음식, 음료 (물 예외)는 섭취 말아야 Smoking: WBC, cortisol, Hb 증가시킴

Venipuncture –Needles 사면 첨단 (Beveled tip) Needle gauge : 주사바늘 구경 크기 √ 번호 높을 수록 작은 구경 바늘 통상사용 바늘: 20-23 gauge 성인 : 21 G 어린이: 23 G 나비침set (Winged blood collection set) Bore or Lumen Shaft Bevel http://www.bd.com/vacutainer/products/venous/

Venipuncture – Safety Needle Examples http://www.bd.com/vacutainer/products/venous Courtesy: Grenier Bio-One GmbH)

Venipuncture – 진공튜브시스템 Courtesy and © Becton, Dickinson and Company https://en.wikipedia.org/wiki/Vacutainer#/

Venipuncture – Syringe System Syringes: 취약한 정맥, 진공튜브 시 collapse되는정맥에 사용 www.tedpella.com Disposable Plastic Syringes Needle Needle Hub Barrel Plunger

Fig 3-6 Keohane EM, Rodak’s Hematology, Elsevier, 2016, p 24 나비침 이용한 정맥천자 작은 혈관, 채혈 까다로운 정맥 환자: Butterfly Needle 사용 Jelco Closed blood collection system Fig 3-6 Keohane EM, Rodak’s Hematology, Elsevier, 2016, p 24

정맥천자 부위 선택 H type 혈관의 경우: √ 팔오금중앙정맥(정중주정맥, median cubital vein) 선호 M type 혈관의 경우: 중앙정맥 (median vein) 선호 Keohane et al., Rodak Hematology 2016, 5th Ed., p24

Needle의 적절한 삽입 vs. 부적절한 삽입 Keohane et al., Rodak Hematology 2016, 5th Ed., p27

신생아 피부천자 부위 √ Keohane et al., Rodak Hematology 2016, 5th Ed., p29 www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/specimen-collection √

정맥채혈 실행 요청 검사에 따른 채혈set 준비; 환자를 공손히 맞이 함 요청서의 환자와 대조확인(성함,생년월일 등 대답하도록) 검체 적합성을 위한 환자 금식상태 확인 Vacutainer 등 채혈 도구 조립 검사에 대한 설명과 함께 안심시키고, 채혈자세 유도 환자에게 주먹을 쥐도록 하여 정맥을 잘 나타나게 한 후, 천자할 부위 5-10 cm 위쪽에 지혈대 (Tourniquet)를 감고, 최적 정맥 선택한 후, 라텍스 장갑 끼고 천자부위 소독 바늘사면 위로 향해(30°유지) 채로 정맥 내 바늘 진입 혈액이 튜브 내로 들어와 차면, 순서대로 새 튜브로 전환

채혈 동영상 및 시범 채혈(Blood collection Demonstration) https://www.youtube.com/watch?v=OAcvwneZ7Fw https://www.youtube.com/watch?v=BqGFnk1SkMI