효모의 발효 실험 08/07 여름과학교실 PPT
모든 생명현상에는 에너지가 필요하다 생물체는 에너지원을 획득하여 필요한 에너지를 만들어낸다 모든 생명현상에는 에너지가 필요하다 생물체는 에너지원을 획득하여 필요한 에너지를 만들어낸다 에너지가 필요행~ ATP
세포 호흡(cellular respiration) 발효(fermentation) 세포가 에너지를 얻는데 가장 보편적으로 사용하는 것은 포도당이며, 이를 통해 ATP를 얻는 데에는 세 가지 대사과정이 존재한다. 해당과정(glycolysis) 세포 호흡(cellular respiration) 발효(fermentation)
<해당과정(Glycolysis)>
<호흡과 발효가 일어나는 경로 >
Materials (한 조 기준) - 드라이이스트 3g - 밀가루 150g - 소형 weighting boat 1개 - 믹싱볼 1개, 50ml 유리비커 1개, 50ml Falcon tube 1개, 온도계, 저울용 스푼, 플라스틱 컵 3개, 랩, 네임펜 - 휴대용 가스레인지, 저울 - 30℃ incubator
<실험조건> 밀가루 + 설탕 + 고열의 전처리 효모 2 밀가루 + 설탕 + 정상 전처리된 효모 1
<이스트 전처리> 1. 증류수 50ml을 준비된 플라스틱 컵에 넣는다. 증류수를 잴 땐 Falcon tube를 사용한다.(조당 2개) 2. 소형 weighing boat와 저울로 드라이이스트 2g을 계량하여 컵에 넣는다. 3. 분말이 다 풀어질 때까지 스푼으로 잘 풀어준 다음 tube 하나는 실온에서 10분, 나머지 하나는 10분간 중탕가열한다. 해당 사진은 준비실험 당시 플라스틱 컵이 없었던 당시의 사진입니다.
위 사진은 준비실험 당시 믹싱볼이 없었던 당시의 사진입니다. 혼동하지 마세요^___________^ <밀가루와 이스트 반죽하기> 4. 대형 weighing boat와 저울로 밀가루 100g을 계량하여 믹싱볼에 넣는다.(조당 2개) 5. 전처리가 끝난 tube에 설탕을 10g을 계량하여 녹인다. 6. 정상 전처리 효모와 고열처리된 효모를 각각의 믹싱볼에 넣고 반죽한다. - 전처리를 마친 이스트를 확 붓지 말고 조금씩 조금씩 믹싱볼에 넣으면서 비닐장갑을 끼지 않고 맨손으로 반죽한다. (확 부을 경우 반죽이 제대로 되지 않을 수 있다) 위 사진은 준비실험 당시 믹싱볼이 없었던 당시의 사진입니다. 혼동하지 마세요^___________^
<발효 및 측정> 7. 반죽을 각각의 플라스틱 컵 속에 넣고 컵 표면에 반죽의 높이를 표시한다. 7. 반죽을 각각의 플라스틱 컵 속에 넣고 컵 표면에 반죽의 높이를 표시한다. 8. 랩으로 컵 입구를 밀봉하고 30℃ 인큐베이터에 넣어둔다. 9. 30분 후와 45분 후의 발효 결과를 관찰 및 비교한다. 10. 결과를 정리하고 깨끗이 정리정돈한다.
추가 슬라이드
< 시트르산 회로 >
<해당과정(Glycolysis)> PFK-1 : F-6-P → F-1,6-BP PFK-2 : F-6-P → F-2,6-BP PFK regulator Positive : ADP, AMP, F26BP Negative : ATP, citrate
Citrate는 PFK-2의 inhibitor 기능도 하고 있으므로 citrate는 glycolysis의 과정을 조절하는데 중요한 두 enzyme인 PFK-1,2의 활성을 모두 억제한다. citrate 첨가의 결과는 효모가 정상적인 glycolysis를 하지 못함으로써 반죽의 발효현상이 지체될 것으로 예상할 수 있다.
<Sucrose 및 Sodium Citrate 첨가>-2차 반죽 7. 대형 Weighing boat 세 개에 각각 DW, Sucrose, Sucrose+Citrate labeling을 확인한 후, 플라스틱 컵 세 개에도 똑같이 labeling 한다. 8. 반죽 세 덩어리를 떼어내어 대형 weighing boat에 담는다. 각각의 weighing boat에 올라간 덩어리의 무게가 40g이 되도록 맞추며 떼어낸다. 9. Boat에 있는 세 개의 반죽에 동시에 각각 증류수 3ml, sucrose 수용액 3ml, sodium citrate + sucrose 수용액 3ml을 넣고 맨손으로 주물러서 반죽과 용액을 섞는다. ☺☺ 주의 사항 - 과도하게 반죽을 하게 되면 너무 차지게 되어 손에서 떨어지지 않고 컵에도 잘 들어가지 않는다.(컵이 잘 깨지므로 조심~!) 반죽의 물기가 너무 많이 날아가기 전에 10번으로 넘어가야 한다. 위 사진은 준비실험 당시 플라스틱 컵이 없었던 당시의 사진입니다. ^^