TLC (Thin Layer Chromatography)

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TLC (Thin Layer Chromatography) 정성, 정량이 가능하고 예비용으로 사용 가능하며, 매우 적은 양의 시료로도 가능하다. PPC에 비해 빠르며 c-H2SO4 등의 시약으로 발색반응 하므로 눈으로 확인할 수 있다. 다만 흡착크로마토그래피이기 때문에 재사용이 불가능하다. 흡착제로는 silica gel, alumina (Al2O3), cellulose, MgO, RP-8, RP-18, polyamide 등을 사용한다. Rf 값  =  용질의 이동 거리 / 용매 선단이 움직인 거리

Principle 고정상에서 용매와 이동상의 binding place와의 친화력의 차를 이용한다. 즉, 각 물질의 고정상에 대한 친화력의 크기에 따라 물질을 나눈다. 고정상이 극성일 경우 : 극성이 더 큰 물질이 고정상에 더 친화력이 커서 binding place에 있는 다른 물질을 떼어내기 쉽다. 따라서 극성이 더 큰 물질은 plate에서 더 낮은 자리에 위치하게 되고, Rf값은 낮아진다. Ex) normal phase silica gel 고정상이 비극성일 경우 : 극성이 더 큰 물질이 고정상에 더 친화력이 낮아서 binding place에 있는 다른 물질을 떼어내기 어렵다. 따라서 극성이 더 큰 물질은 plate에서 더 높은 자리에 위치하게 되고, Rf값은 낮아진다. Ex) C18-functionalized silica

Method 1. Plate를 준비하고 layer를 activation 시킨다. 2. 용매를 선택한다. (Rf. 0.4 ~ 0.6)이 되도록 3. 시료를 바르고 chamber를 나눈다. 4. 발색반응을 통해 확인한다.     destructive : H2SO4     nondestructive : UV        specific : Dragendorff's reagent     universal : H2SO4, I2 chamber, UV